大题06 基因工程与细胞工程类-【大题精做】冲刺2024年高考生物大题突破+限时集训（江苏专用）

大题06 细胞工程与基因工程类 考情分析：明真题、析命题、巧备考 内容概览 琢题突破：3大考向，典例+变式巧练 实战演练：刷真题、刷模拟，全面提升 · 真题探寻 考点 考向 高考考题分布 生物与环境 微生物培养与应用综合 动物细胞培养与单克隆抗体制备 基因工程综合 2023江苏 T22 2022江苏 T24 2021江苏 T23 2020江苏 T28 2020江苏 T31 2020江苏 T33 2019江苏 T33 · 命题分析 细胞工程与基因工程类试题在近年江苏高考试卷中以22/23/24题形式出现，是高考生物科技专题的重要内容，也是重点和难点。从2019-2023年几年内，基因工程版块知识点均有不同程度的考察，如：目的基因的获取、目的基因的检测和鉴定、基因表达载体的构建、PCR扩增的原理与过程以及以这些知识点进行基因工程的综合考察。 学生需要理解基因工程和细胞工程的基本概念和原理，包括基因操作技术、DNA重组、PCR技术、细胞培养等方面的知识。同时要注意对设计实验方案、进行实验操作能力的培养，包括实验步骤的设计、实验条件的选择、实验结果的分析和解释等。近年来，基因工程题目通常基于学科发展的前沿内容，与新型生物学技术联系起来，如基因编辑技术-Crispr cas9、基因测序技术、琼脂糖凝胶电泳技术、基因敲除技术等。 考向01 微生物培养与应用综合 一．微生物培养的无菌技术 1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。无菌技术应围绕如何避免杂菌的污染展开。主要包括消毒和灭菌。 2.消毒:是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 a.日常生活中经常用到煮沸消毒法，操作方法：100 ℃煮沸5～6min； b.对于一些不耐高温的液体如牛奶，可使用巴氏消毒法，操作方法：62～65℃消毒30min或80～90℃消毒30s-1min； c.生物活体、水源等还可使用化学药物进行消毒，操作方法：用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等； d.接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射，操作方法：紫外线照射30min。 3.灭菌:是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 a.培养基、培养皿等一般用湿热灭菌法，其中高压蒸汽灭菌的效果最好，操作方法：高压蒸汽灭菌锅内, 以水蒸气为介质，灭菌条件为压力100kPa、温度121℃、时间15-30min。 b.耐高温的和需要保持干燥物品，如玻璃器皿、金属用具等，可以用干热灭菌法，操作方法：使用的仪器为干热灭菌箱，以热空气为介质，灭菌条件为温度160-170℃、时间2-3h。 c.接种过程中，微生物的接种工具、试管口、瓶口通过灼烧灭菌法来灭菌，操作方法：将需灭菌的用具直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，优点是可以迅速彻底地灭菌。 二．微生物的数量测定 1.微生物的数量测定方法：间接计数法——稀释涂布平板法、直接计数法——显微镜直接计数法。 2．稀释涂布平板法 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目。 恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。 ②计数原则：选择菌落数为30-300的平板计数；同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 ③结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目少；这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 ④ C代表某一稀释度下平板上生长菌落数的平均值；V代表涂布平板时吸取的稀释液体积数值(mL)；M代表稀释倍数；则每g样品中的细菌数=（C÷V）×M。 计算：将1ml水样稀释100倍，在三个平板上用涂布法分别接入0.1ml稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×100×1000。 3．显微镜直接计数法 ①原理：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。 ②计数工具：血细胞计数板常用对相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等计数； 细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。 ③优点：快速直观。 缺点：统计结果一般是活菌数和死菌数的总和，比实际值偏大。个体小的细菌在显微镜下难以观察。 1．（2020·江苏·高考真题）产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题： （1）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是 （填编号）。 编号 ① ② ③ ④ 物品