内容正文:
2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体的学案
【学习目标】
1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物|学等手段.使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。
3.收集单克隆抗体在临床上实际应用的资料,并进行交流分享。
【学习重难点】
教学重点
1.动物细胞培养的条件和过程。
2.干细胞在生物医学工程中的应用。
3.单克隆抗体的制备和应用。
4.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
教学难点
1.单克隆抗体的制备过程。
2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
【预习新知】
动物细胞融合技术
1.定义:使 个或 个动物细胞结合形成 个细胞的技术。
2.结果:融合后形成的杂交细胞具有原来 个或 个细胞的遗传信息。
3.原理: 。
4.诱导融合常用的方法: 、 、 。
(1) 法是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。
(2) 不灭活的病毒会 细胞,因而不能用于诱导细胞融合。
(3) 与植物原生质体融合方法对比,诱导动物细胞融合的特有方法是 。
5.特点:突破了 的局限,使 成为可能。
6.动物细胞融合技术涉及的变异类型是 。
7.应用
(1) 间、属间、科间,甚至动物与植物之间的细胞融合都已获得了成功。
(2)动物细胞融合技术已成为研究细胞 、细胞 、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(3)利用动物细胞融合技术发展起来的 技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。
单克隆抗体及其应用
1. 血清抗体与单克隆抗体的比较
名称
产生
特点
血清抗体
由 分泌
一般从血清中分离,产量低、 低、 差
单克隆抗体
由 分泌
强, 高,能
2. 制备单克隆抗体的基本原理
(1) 一种淋巴细胞 产生一种
(2) 小鼠骨髓瘤细胞能在体外
(3) 利用动物细胞融合技术产生的杂交瘤细胞可以保持亲代双方的特性
(4) 筛选杂交瘤细胞,杂交瘤细胞在体外培养时可 并获得所需抗体
3. 单克隆抗体的制备
a:
b:
c:
d:
4. 单克隆抗体的应用:
(1) 用作
(2) 用于 和治疗疾病
【易错提示】
1.动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2.动物细胞融合常用的诱导方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法。
3.动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体。
4.杂交瘤细胞是由经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的,具有既能无限增殖又能产生专一抗体的能力。
5.制备单克隆抗体过程中第一次筛选是为了获得杂交瘤细胞,第二次筛选是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
6.单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高,并可大量制备。
7.单克隆抗体的主要用途有:作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物。
【深化探究】
动物细胞融合
1.融合的原理与过程
(1)原理:细胞膜的流动性。
(2)过程:动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性,细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。如下图(以灭活的病毒诱导为例):
2.融合的结果
形成单核杂交细胞,具有原来两个或多个细胞的遗传信息,可表现出两个或多个亲本的特点。
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、细胞的全能性
细胞膜的流动性、细胞的增殖
融合前处理
先除去细胞壁
先使细胞分散开
使用的酶
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
诱导手段
物理法:电融合法、离心法
化学法:PEG融合法
除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导