1.2.1 微生物的基本培养技术的学案-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

1.2.1微生物的基本培养技术的学案 【学习目标】 1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。 2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。 3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。 【学习重难点】 【教学重点】 1.微生物纯培养的基本操作要求，微生物选择培养的原理。 2.酵母菌的纯培养。 3.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【教学难点】 1.酵母菌的纯培养。 2.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【预习新知】 培养基的配制 1．培养基 人们按照微生物对___________的不同需求，配制出的供其________的营养基质。 2．培养基的用途：用以培养、分离、鉴定、________或____________。 3．培养基的配方 (1)各种培养基一般都含有水、________(提供________的物质)、________(提供氮元素的物质)和无机盐等营养物质。如下表为某微生物培养基的成分： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至 1 000 mL 该培养基中可以为微生物提供氮源的是________，可以为微生物提供碳源的是________和________。此培养基中加入了________，为固体培养基。 (2)还需要满足微生物生长对pH、____________以及O2的需求。 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊 需求 添加维生素 pH调至 酸性 pH调至中性 或弱碱性 提供无 氧环境 答案： 1．营养物质　生长繁殖 2．保存微生物　积累其代谢物 3．(1)碳源　碳元素　氮源　尿素　葡萄糖　尿素　琼脂(2)特殊营养物质 无菌技术 1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止__________。 2．消毒和灭菌 消毒 灭菌 概念 使用较为___的物理、化学或生物等方法杀死物体____或内部一部分微生物 使用____的理化方法杀死物体内外____的微生物，包括_______ 常用方法 ___消毒法、巴氏消毒法、___消毒法、紫外线消毒法 ____灭菌、干热灭菌、____灭菌 适用对象 操作空间、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 3.具体操作 (1)对实验操作的____、操作者的衣着和手进行清洁和___。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行____。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与__________接触。 微生物的纯培养 1．纯培养：在微生物学中，将接种于_____内，在合适条件下形成的含_______的群体称为培养物。由_________所获得的微生物群体称为纯培养物，获得________的过程就是纯培养。 2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、____、____、分离和培养等步骤。 3．酵母菌的纯培养 (1)菌落：分散的微生物在适宜的________表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的__________。 (2)获得单菌落的方法：_______法和__________法。 【易错提示】 无菌操作中的注意事项 (1)用体积分数为70%的酒精消毒效果最好，原因是浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜，酒精不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。 (2)接种室、接种箱和超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30 min，以杀死物体表面或空气中的微生物。在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。 (3)芽孢是某些细菌生长到一定阶段，在细胞内形成的休眠体。孢子是某些微生物的繁殖体。 (4)一般情况下，在实验操作过程中，对能灭菌的对象进行灭菌处理，如培养皿及用到的各种器具；对无法灭菌的对象则进行消毒处理，如实验操作者的衣着和双手等。 (5)与煮沸消毒法相比，巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。 (6)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染。 【深化探究】 1．(科学探究)请结合倒平板的操作程序探究： (1)如图一所示，为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ (2)如图二所示，从防止杂菌污染的角度思考，为什么培养基冷却凝固后将平板倒置？ (3)怎样判断培养基制备是否合格、成功，是否受到污染？ (1)提示：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 (2)提示：培养基冷却凝固后，皿盖上会凝结水珠