1.2 微生物的培养技术及应用（第2课时） 课件 2023—2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章第2节 微生物的基本培养技术（第2课时） 目录 Contents 1 培养基的配制 2 无菌技术 3 微生物的纯培养 3 微生物的纯培养 纯培养物： 纯培养： 培养物： 将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。 获得纯培养物的过程就是纯培养。 配置培养基 灭菌 倒平板 接种和分离 培养 操作步骤： 念珠菌显色培养基 大肠杆菌培养基 酵母菌培养基 金黄色葡萄球菌和枯草杆菌培养基 3 微生物的纯培养 【探究和实践】 酵母菌的纯培养 菌落： 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。 微生物的常用接种方法： ____________和_________________。 平板划线法 单菌落： 由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 稀释涂布平板法 3 微生物的纯培养 【探究和实践】 酵母菌的纯培养 目的要求： 1.学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。 2.学会进行无菌操作。 3.尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。 材料用具: 酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸（或报纸）、皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。 方法步骤： 称取去皮的马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15~20g琼脂，用蒸馏水定容至1000mL。 ①配制培养基 ②灭菌 将配置好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15~30min。将5~8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160~170℃灭菌2h。 棉塞表面比较松散，很容易有细菌附着，一旦操作不慎，就会使灭菌好的培养基二次污染。而牛皮纸或报纸，表面比较紧密，隔绝开了空气中的微生物。 3 微生物的纯培养 【探究和实践】 酵母菌的纯培养 配置培养基 灭菌 方法步骤： 3 微生物的纯培养 【探究和实践】 酵母菌的纯培养 倒平板 待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰旁附近倒平板。倒平板的具体操作步骤如下。 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 不要完全打开，以免杂菌污染培养基 既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板时高于50℃会烫手，低于50℃时，若不及时操作，琼脂会凝固。 配置培养基 灭菌 方法步骤： 倒平板 在倒平板的过程中，若不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 不能，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 接种和分离 方法步骤： 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。 注意事项 接种和分离 方法步骤： 上次划线的末端 增加 减少 单个细菌 第一区 灼烧并冷却 防止温度太高杀死菌种 灼烧的目的 避免杂菌的污染 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种来自上次划线末端 杀死残留菌种，避免污染环境、感染操作者 接种和分离 方法步骤： 接种方法： 平板划线法介绍 接种方法： 平板划线法 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24~48h。 培养酵母菌 方法步骤： 未接种的平板作为对照组，若有其上菌落生长，则说明培养基被污染或者灭菌不彻底。 警示：在实验室中，切记不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。 1. 在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？ 结果分析与评价： 在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染。 2. 在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、形状和大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ 如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。 【思维训练】 如果要更加有力地支持或反驳水果“酵素”有益健康的论点，应该怎样获取证据？ 所谓“酵素”，就是“酶”的另一种说法。“酵素”制作就是利用微生物进行无氧呼吸的原理，进行像制作泡菜一样的发酵。这样制作的“酵素”中可能有糖类(包括一些简单的糖和膳食纤维等)、蛋白质(包括多种酶)、