内容正文:
忆旧知—如何培养T2噬菌体(病毒)
如何培养得到纯大肠杆菌呢?
1.2 微生物的培养技术及应用
— 微生物的基本培养技术
学习目标:
概述培养基的配制方法和常用灭菌方法。
掌握微生物纯培养技术的基本操作要求,并尝试对酵母菌进行纯培养。
高二生物备课组
微生物的基本培养技术
研究和应用微生物的前提
1.防止杂菌污染;
2.获得纯净的微生物培养物。
发酵工程的重要基础
实验室培养微生物的基本思路
1.为微生物提供合适的营养和环境条件;
2.确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。
培养基的配制
自主阅读P9-10
1.培养基概念、作用、类型
(1)概念:
(2)作用:
(3)类型:
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(2)按化学组成:天然培养基、合成培养基。
(3)按目的用途:选择培养基、鉴别培养基。
(1)按物理性质:液体培养基、固体培养基。
(是否含凝固剂)
(扩大培养)
(分离、计数、鉴定等)
2.培养基的营养构成:
分析表1-1培养基的营养构成
水、碳源、氮源、无机盐。
氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。
培养基的配制
(1)为什么培养基需要氮源?
(2)培养微生物时,培养基中是否必须有碳源和氮源?
不一定。例如,培养自养型微生物时,一般不需要添加碳源,光能自养型微生物可以利用空气中的CO2;化能自养型微生物可以利用空气中的NH3;培养固氮微生物时,一般不需要添加氮源,微生物可以利用空气中的N2。
分析表1-1培养基的营养构成
(2)特殊需求:
满足微生物对 _____________________________的需求
④培养厌氧微生物时,需要提供_____的条件。
①培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加_______;
②培养霉菌时,需要将培养基调至_____;
③培养细菌时,需要将培养基调至_____________;
维生素
酸性
中性或弱碱性
无氧
pH、特殊营养物质、氧气
培养基的配制
B
1.关键:
2.无菌技术
(1)消毒
(2)灭菌
防止杂菌污染
温和的物理、化学或生物
一部分
强烈的理化方法
所有
包括芽孢和孢子
煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒、巴氏消毒法
云天化中学
无菌技术
湿热灭菌(高压蒸汽灭菌效果最好)
干热灭菌
灼烧灭菌
注意:
避免已经灭菌的材料用具与周围物品接触;
为了避免周围环境微生物污染,操作应在超净工作台并在酒精灯火焰旁进行。
连一连:物品所对应的灭菌或消毒方法
培养基
培养皿
接种环
实验操作者的双手
实验室
牛奶
湿热灭菌
干热灭菌
灼烧灭菌
化学药剂消毒
紫外线消毒
巴氏消毒法
1.培养物
2.纯培养物
3.纯培养
4.步骤
在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的培养。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体
获得纯培养物的过程就是纯培养。
配制培养基、灭菌、接种、分离、培养等
微生物的纯培养
【探究·实践】 酵母菌的纯培养
菌落:
单个微生物在培养基表面或内部形成一个肉眼可见的,具有一定 形态结构的子细胞群体,叫做菌落。
1、方法:
2、原理:
平板划线法和稀释涂布平板法
是鉴定菌种的重要依据。
细菌
放线菌
霉菌
酵母菌
【探究·实践】 酵母菌的纯培养
倒平板
平板划线
恒温培养箱培养
(28℃,1-2 d)
避免杂菌污染
【倒平板操作】操作过程中如何避免杂菌污染?
思考讨论
②为什么倒平板时,将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不能完全打开?
③为什么冷却后的平板需要倒置?
①培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉温度下降到刚刚不烫手即可。
防止杂菌污染培养基
防止皿盖上的水珠落入培养基;避免杂菌污染。
④在接种前,取灭菌后的未接种的培养基,先培养一段时间,这样的目的是?
检测培养基平板灭菌是否合格。
【平板划线操作】操作过程中如何实现获得单细胞的呢?
通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养可以分离得到单细胞。
恒温培养箱培养
(28℃,1-2 d)
单菌落
1.完成下表
2.在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进