1.2 微生物的培养技术及应用 课件 2023—2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第一节　体液调节是通过化学信号实现的调节 第二节　神经系统通过下丘脑控制内分泌系统 第二节　神经系统通过下丘脑控制内分泌系统 第二节 纯净的目标微生物可通过 分离和纯化获得 一、采用划线或涂布的接种方法能够实现对目标微生物的分离和纯化 1.接种方法 接种：微生物进入培养基质的过程。 自然接种：牛奶暴露在空气中，会由于微生物落入、生长、繁殖而变质。 人为接种：挑取目标微生物的纯种将其转移到液体培养基中培养，或在培养基斜面连续划线用于保存菌种（接种环）。 单菌落：在固体培养基上通过接种、培养获得的由一个细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团。 2.单菌落分离 意义： 单菌落的分离是消除杂菌污染的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一. 单菌落分离或接种的方法：通过平板划线法和稀释涂布平板法等方法获得单菌落 3．平板划线法： （1）原理 ：接种环划线的过程中，菌液被逐渐稀释，最终出现单个细菌，培养后形成单菌落。 (2)方法：通常用___________蘸取 液体培养物或挑取固体表面的 微生物后，在固体培养基表面进 行连续平行划线、______________ 或其他形式的划线，以实现 接种的目的。 (3)划线方式的比较 扇形划线 接种环 ① ② ③ ④ ⑤ 平板划线法的过程 ⑥ 平板划线法 平板划线法 第1区划线 接种环灭菌 第2区划线 接种环灭菌 第3区划线 接种环灭菌 接种环灭菌 1 2 3 4 5 多次平行划线 思考：若完成图示操作，共做了五次划线，接种环灼烧灭菌了几次？ 连续划线法 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 思考： 操作的第一步灼烧接种环：是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 每次划线前灼烧接种环：是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 划线结束后仍灼烧接种环：能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 1.微生物接种的方法很多,平板划线法是常用的一种。下图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是(　　) A.划线操作时,将蘸有菌种的接种环插入培养基 B.平板划线后,培养微生物时要倒置培养 C.不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连 D.在第②~④区域中划线前都要对接种环进行灭菌 A 划线时不能将接种环插入培养基,而是在培养基表面划线 2：在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种 （甲）、培养结果（乙）如图所示。 有关叙述错误的是 （ ） Ａ．接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌 Ｂ．连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 Ｃ．接种过程中至少需要对接种环灼烧 ５ 次 Ｄ．甲中 ａ 区域为划线的起始位置 3．下列有关微生物培养的叙述中，不正确的是 （ ） Ａ．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 Ｂ．单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法 Ｃ．培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌 Ｄ．倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 D C 4。要筛选得到纯 净的菌种，通常在固体培养基上划线分离，下列操作正确的是（ ） Ａ．每次划线时，接种环都需蘸菌液一次 Ｂ．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种 Ｃ．在超净台中接种时要在酒精灯火焰旁进行 Ｄ．划线分离后将培养皿正放在恒温培养箱中培养 c 5. 若实验室为分离纯化优良菌种进 行如下操作，排序最合理的是 （ ） Ａ．②①④③ Ｂ．②①④①③② Ｃ．②①④②③② Ｄ．①④①③② B 4．稀释涂布平板法 接种时，通常需要先将菌液进行_____________，并在培养皿 侧面或底面做好标记后，将稀释度不同的菌液各取0.1 mL，（移液管或枪）加在固体培养基表面，然后用___________将菌液均匀地涂布 在培养基表面上进行培养。这样在稀释度适当的固体培养基表面也能得到单个细胞生长繁殖成的单菌落。根据菌落的形状，大小、颜色、边缘或表面光滑与否等特征可以选取目标微生物继续培养。 梯度稀释 涂布器 a.原理 ：用无菌水将菌液进行一系列的梯度稀释，在适当的稀释度下，可培养得到相互分开的单菌落。