1.2 微生物的培养技术及应用（第1课时）课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第2节 微生物的培养技术及应用 非细胞型：病毒 细胞型 细菌 真菌 微生物 原生生物 （一）培养基的配置 2.分类： 1.定义：按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长 繁殖的营养基质。 一、微生物的基本培养技术 3.营养组成：水、碳源、氮源、无机盐 ①碳源：为微生物提供所需碳元素的营养物质。 如：CO2、NaHCO3；石油、牛肉膏、蛋白胨、糖类、脂肪酸等 ②氮源：为微生物提供所需氮元素的营养物质。 如：N2、NH4NO3；尿素、氨基酸、牛肉膏、蛋白胨等 ③无机盐：除C、H、O、N元素外微生物所需的其他元素 如：NaCl、KH2PO4、CaCl2、MgSO4等 4.其他条件：pH、特殊营养物质、O2的需求 如：培养乳酸杆菌，需要添加维生素； 培养霉菌，需要酸性环境； 培养细菌，需要中性或微碱性环境； 培养厌氧微生物，需要无氧条件。 （一）培养基的配置 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 2.称量 3.溶化 4.灭菌 5.倒平板 1.计算 溶药品→煮溶琼脂 →定容→调pH 培养基、培养皿 灭菌 冷却到50℃左右， 在酒精灯火焰附近操作 根据培养基配方→计算配制所需各种成分用量 先调pH。如果灭菌后再调pH，可能造成污染。 强 调 1.制备培养基时，溶化完所有药品，应该先灭菌还是先调节pH？ 2.培养基灭菌后，为什么要冷却到50 ℃左右时才倒平板。 你用什么办法来估计培养基的温度？ ①温度过高，烫手且易损坏培养皿；温度过低，培养基开始凝固了。 ②用手背估计，以刚刚不烫手为宜。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中水分过快的挥发。 1.目的：①防止杂菌污染。 ②避免操作者自身被微生物感染。 （二）无菌技术 2.方法： 消毒：使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的 一部分微生物。 灭菌：使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 3.主要包括： ①操作空间，操作者的衣服和手进行清洁和消毒 ②微生物培养器皿，接种用具和培养基进行灭菌 ③应该避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触 ④微生物实验操作过程应该在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行 1.概念：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物， 获得纯培养物的过程就是纯培养。 （三）微生物的纯培养 2.步骤：配置培养基、灭菌、接种、分离和培养等。 定义：分散的微生物在适宜的固体培养基 表面或内部可以繁殖形成肉眼可见、 有一定形态结构的子细胞群体。 特征：大小、形状、隆起程度、颜色、 边缘形态等。 应用：可以作为菌种鉴定的重要依据。 菌落 单菌落 ① ② ③ ④ ⑤ 酵母菌的纯培养 1.制备培养基 2.接种和分离酵母菌 3.培养酵母菌 配制培养基、 灭菌、倒平板 接种后的平板和未接种的平板倒置， 28℃左右恒温培养24-48h ⑥ 平板划线法 接种环温度过高时就划线，可能杀死平板上的酵母菌。 逐步稀释平板上的酵母菌，以期最后能得到单独的菌落。 实验目的是要逐步稀释酵母菌，若最后划的线与第一区域相连，第一区域的酵母菌可能转移到最后一区域，导致稀释失败。 1.灼烧接种环后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 2.从第二次划线开始，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 3.为什么最后一区域的划线不能与第一区域相连？ 注 意 ①第一步划线前要灼烧是为避免接种环可能带上杂菌， 影响对酵母菌的纯化。 ②之后每次划线前都灼烧，是为保证接种环无菌，每次 的划线都是对上一次的稀释。 ③操作结束后仍要灼烧，对接种环进行灭菌，以防微生物 对环境的污染。 4.为什么在操作的第一步以及每次划线前都要灼烧接种环？ 划线操作结束时，还需要灼烧接种环么？ 5.如果最终在平板上划出五个区域， 整个过程需对接种环进行几次灼烧？ 6次。 注 意 二、微生物的选择培养和计数 1.概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长， 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 （一）选择培养基 2.微生物筛选原理：人为提供有利于目的菌生长的条件 （包括营养、温度和pH等）， 同时抑制或阻止其他微生物的生长 尿素【CO(NH2)2】含氮量高，是重要氮肥。施入土壤后，会被土壤中的某些细菌（产生脲酶催化）分解成NH3，NH3再转化为NO3-、NH4+等被