内容正文:
本节聚焦
第2节 微生物的培养技术及应用
一 微生物的基本培养技术
什么是培养基?如何配制?
什么是无菌技术?
怎样进行酵母菌的纯培养?
第1章
发酵工程
1
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶,由于制作工艺并不复杂,一些人会在家里自制酸奶,自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。
从社会中来
那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件,避免杂菌进入。
防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提,也是发酵工程的重要基础。
1.培养基的概念
人们按照微生物对______的不同需求,配制出供其 _____的营养基质。
2.培养基的用途
用以___、___、___、保存微生物或积累其代谢物。
营养物质
生长繁殖
一、培养基的配制
培养
分离
鉴定
相关信息
微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物。
放线菌
3.培养基的常见类型(按物理性质分)
(1)液体培养基
不含____(如琼脂)、呈液体状态的培养基。
(2)固体培养基
呈固体状态的培养基。
一、培养基的配制
凝固剂
琼脂仅作为凝固剂,不能为微生物生长提供能量和碳源。
琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一
长有酵母菌菌落的固体培养基
液体培养基
4.培养基的配方
(1)主要营养物质
水、___、___、____等。
一、培养基的配制
碳源
氮源
无机盐
组 分 含 量 提供的主要营养物质
牛肉膏 5g
蛋白胨 10g
NaCl 5g
H2O 定容至1000mL 水
特殊营养物质
微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧
微生物
特殊需求 添加
___ pH调至______ pH调至
_________
_________ 无氧
维生素
酸性
中性或
弱碱性
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
(2)其他条件
pH、______、O2的需求
例如:
碳源、氮源、磷酸盐和维生素等
碳源、氮源和维生素等
无机盐
提供碳元素的物质
提供氮元素的物质
思考
1.下表是某培养基的配方,分析回答:
一、培养基的配制
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 5 g 10 g 5 g 20 g 定容至1000 mL
(1)该培养基中提供碳源和氮源的物质是什么?为什么培养基需要氮源?
提示:该培养基中牛肉膏和蛋白胨提供碳源和氮源。
培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质必需的。
思考
1.下表是某培养基的配方,分析回答:
一、培养基的配制
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 5 g 10 g 5 g 20 g 定容至1000 mL
(2)该培养基培养的微生物同化作用类型是______________,理由是什么?
该微生物的碳源和氮源是有机物。
异养型微生物
思考
2.培养微生物时,培养基中是否必须有碳源和氮源?
提示:不一定。例如,培养自养型微生物时,一般不需要添加碳源,微生物可以利用空气中的CO2;培养固氮微生物时,一般不需要添加氮源,微生物可以利用空气中的N2。
一、培养基的配制
思考
3.下表是某微生物培养基的成分,请分析该培养基可用来培养哪种微生物?若除去①,此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗?
一、培养基的配制
提示:此培养基可用来培养自养型微生物。
若除去①圆褐固氮菌虽可以固氮,但其同化作用类型为异养型,培养基中必须提供含碳有机物,所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
归纳提升——几种微生物的营养和能量来源
即 时 巩 固
1.下列有关培养基的叙述,错误的是( )
A.微生物的培养都需要提供水、有机碳源、有机氮源、无机盐,缺一不可
B.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落
C.在培养细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性
D.培养基既能培养细菌,也能培养真菌
A
即 时 巩 固
2.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养型微生物所需营养的描述中,错误的是( )
A.氮源物