内容正文:
第一章 发酵工程
1.2微生物的培养技术及应用
固体培养基
盛有液体培养基
1.2微生物的培养技术及应用
第二课时 微生物的选择培养和计数
选择培养基
微生物的选择培养
01
02
微生物的数量测定
03
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
04
本节聚焦
怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理?
如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物?
测定微生物数量的常用方法有哪些?
01选择培养基
自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合的菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢?
选择培养基
01选择培养基
1973年,科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌,进而提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于聚合酶链式反应(PCR)。
1.为什么水生栖热菌能更容易在热泉中找到并被筛选出来呢?
这是因为水生栖热菌适应热泉的环境,能在 70~80 ℃的高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
2.在自然界中,想进行微生物筛选的原则是什么?
根据微生物对生存环境的要求,到相应环境中去寻找。
实验室筛选微生物原理:
人为提供_______________的条件(包括_____、_____和_____等),同时_______________________
根据微生物对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
有利于目的菌生长
抑制或阻止其他微生物的生长
营养
温度
pH
耐热微生物
耐寒微生物
石油分解菌
01选择培养基
选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
不加碳源的培养基
分离出自养微生物
不加氮源的培养基
分离固氮微生物
加青霉素的培养基
分离真菌
加高浓度食盐
分离金黄色葡萄球菌
改变培养条件
添加某种化学物质
营养缺陷
选择培养基类型
01选择培养基
耐高温微生物
高温环境下培养
厌氧型和兼性厌氧型微生物
无氧环境下培养
④特殊碳、氮源
石油是唯一碳源
能消除石油污染的微生物
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
培养基中加氨苄青霉素
具有氨苄青霉素抗性的菌落
没有氨苄青霉素抗性的细菌
培养基应有菌落
没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰
怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?
应设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)作为对照,若基础培养基中生长的菌落数多于该选择培养基,则说明该选择培养基具有选择性。
(1)目的:分离酵母菌、霉菌等真菌,防止细菌生长
原理:青霉素能抑制细菌生长,对真菌无作用
配制:使用____________的培养基
(2)目的:分离固氮菌
原理:固氮微生物能利用空气中的氮气
配制:使用_______________________的培养基
(3)目的:分离自养型微生物
原理:自养型微生物能利用无机碳源
配制:使用___________________________的培养基
(4)目的:分离耐酸菌
原理:耐酸菌能在pH为酸性的条件下生长
配制:使用_______________的培养基
加入青霉素
不加氮源(以N2为氮源)
不加有机碳源(以CO2为碳源)
将pH调至酸性
01选择培养基
应用
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
微生物 碳源 氮源 能源
蓝细菌 CO2 光能
硝化细菌 NH3 NH3的氧化
根瘤菌 N2 有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物
自养
微生物
异养
微生物
CO2
糖类等有机物
下表是某微生物培养基的成分,请分析该培养基可用来培养哪种微生物?若除去①,此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗?
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
此培养基可用来培养自养型微生物。
圆褐固氮菌虽可以固氮,但其同化作用类型为异养型,培养基中必须提供有机碳源,所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。
项目 选择培养基 鉴别培养基
原理
用途
举例
图示
加入不影响甚至促进目标微生物生长,而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质
加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长),使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应
培养、分离出目标微生物
鉴别目标微生物
培养酵母菌和霉菌时,可在培养基中加入青霉素,抑制细菌的生长;利用以尿素为唯一氮