内容正文:
微生物的基本培养技术及应用
无细胞结构
原核细胞
真核细胞
微生物:
真菌:酵母菌、毛霉等;
原生生物:草履虫、变形虫等
微生物的类群
病毒
SARS病毒、新冠病毒等RNA病毒;噬菌体等DNA病毒
细菌(大肠杆菌、乳酸菌、根瘤菌、硝化细菌)、蓝细菌、
放线菌、支原体、衣原体等
难以用肉眼观察的微小生物的统称。
本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。
导入
微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想看某种纯净的微生物。我们该怎么做?若想通过肉眼能看到细菌,我们又该如何?
必须对其进行分离纯化;
对微生物进行大量培养,致使其在适宜的琼脂固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落。
不同的细菌具有不同的菌落。
菌落是鉴定菌种的重要依据
肺炎链球菌
R型细菌
(菌落粗糙)
S型细菌
(菌落光滑)
1.培养基的概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其__________的营养基质——培养基,用以培养、______、鉴定、______微生物或积累其代谢物。
营养物质
生长繁殖
分离
保存
培养基的配制
碳源
氮源
2. 主要营养物质:水、______(提供碳元素的物质)、______(提供氮元素的物质)和无机盐。
3.培养基的种类
培养基种类 划分标准 培养基特点 作用
______培养基 ________ 加凝固剂,如_____ 微生物的分离与鉴定,活菌计数,保藏菌种
半固体培养基 容器放倒不致流出,剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定
______培养基 不加凝固剂 常用于工业生产
固体
琼脂
物理性质
液体
特别提醒 固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂,不能为微生物生长提供能量和碳源。
4.培养基的营养构成:
各种培养基的配方不同,但一般都含有水、 无机盐、碳源和氮源等营养物质。
①概念:
(1)碳源
②种类:
凡是能提供碳元素的物质,统称为碳源
无机碳源
有机碳源
CO2、CO32-、HCO3-等含碳无机物
糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等含碳有机物,常用:糖类,尤其是葡萄糖。
③功能:
主要用于构成细胞物质和一些代谢产物;
有机碳既是碳源又是异养微生物的能源物质。
自养微生物
异养微生物
【说明】含有C、H、O、N的有机物可作为异养型微生物的碳源、氮源、能源。
①概念:
(2)氮源
②种类:
③功能:
凡是能提供氮元素的物质,统称为氮源
无机氮源
有机氮源
主要用于合成蛋白质、核酸及含氮代谢产物等
NH4+、NO3-、NH3等
牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
牛肉膏和蛋白胨来源于动物含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
P10 旁栏思考题
一般情况下,不添加氮源培养基可用来培养固氮微生物
(3)水
(4)无机盐
①良好的溶剂;
②维持生物大分子结构的稳定。
①提供无机营养;
②调节pH;
③维持渗透压。
几种微生物的营养和能量来源分析
微生物 碳源 氮源 能源
蓝细菌 CO2 NH4+、NO3-等 光能
硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化
根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物
1.自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于 ;
自养型微生物所需的碳源来自 碳源,
异养型微生物所需的碳源来自 碳源
2.无机氮源不但能给自养型微生物提供 ,也能作为 ,
3.含有C、H、O、N的有机物可作为 微生物的碳源、氮源、能源;
碳源
无机
有机
氮源
能源物质
异养型
① 含有C、H、O、N的有机物可作为异养型微生物的碳源、氮源、能源。
② 自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于碳源。
因此可以根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。
③无机氮源不但能给自养型微生物提供氮源,也能作为能源物质,如NH3既作为硝化细菌的氮源,也作为能源(NH3氧化释放的化学能)。
④微生物常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;常用的无机氮源是铵盐、硝酸盐
特别提醒
某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5 g ___________________________等
蛋白胨 10 g ______________________等
NaCl 5 g 无机盐
H2O 定容至1 000 mL 水
碳源、氮源、磷酸盐和维生素
碳源、氮源和维生素
培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如,在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加________;在培养霉菌时,一般需要将培养基调至______;在培养细菌时,一般需