1.2.2微生物的选择培养和计数（含视频）（教学课件）-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数 第1章　发酵工程 人教版高中生物 选择性必修3 1 1 阐明微生物选择培养的原理。 2 进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数(重、难点)。 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。那么我们又如何达成这一目标呢？ 科学家们应用选择性培养基解决了这一难题。 > < 目标一 选择培养基、微生物的选择培养和数量测定 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 1.1 选择培养基 (1)实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的　　　　　　中提取出来的。 (2)依据：水生栖热菌能在　　　　　的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 水生栖热菌 70～80 ℃ 1 自然界中目的菌的筛选 (1)原理：人为提供有利于　　　　　生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时 　　　　　其他微生物的生长。 (2)方法：利用选择培养基分离。 选择培养基：允许　　　　　的微生物生长，同时　　　　　　其他种类微生物生长的培养基。 目的菌 抑制或阻止 特定种类 抑制或阻止 1.1 选择培养基 2 实验室中目的菌的筛选 一边阅读，一边完成学案上的表格 活动1 选择培养基配方的设计 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源。 讨论： 1.通常1 g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中，细菌的数量最多，能分解尿素的细菌是其中的一部分。如何设计培养基的配方，从而将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 设计一种选择培养基，以尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 (细菌生长的氮源) 尿素 NH3 脲酶 尿素分解菌 1.2 微生物的选择培养 1.3 微生物的数量测定 ② 计数原则： 缺点： 统计的_________往往比______的实际数目少 ① 原理： 【原因：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。】 方法1：稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个______。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少______。 选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为_______、适于计数的平板。 在同一稀释度下，应至少对___个平板进行重复计数，然后求出_______。 活菌 活菌 30～300 平均值 3 菌落数 活菌 1.3 微生物的数量测定 M：代表稀释倍数； C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数； V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) 间接计数法 4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为________个 方法1：稀释涂布平板法 ③ 计算公式： 每g样品中的菌落数＝(C÷V)×M 1.1×108 1.3 微生物的数量测定 快速、直观 方法2：显微镜直接计数法 直接计数法 两者计数原理相同 原理： 利用细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 优点： 缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数。 个体小的细菌在显微镜下难以观察； →偏大 对细菌等较小的细胞进行观察和计数 常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数 项目 显微镜直接计数法 稀释涂布平板法 主要用具 显微镜、_____________ 　　　　　　 等 培养基等 计数依据 菌株本身 培养基上的　 　数 优点 计数方便、操作简单 计数的都是活菌 缺点 死菌、活菌都计数在内 操作复杂、有一定误差 血细胞计数板 或细菌计数板 菌落 一边阅读，一边完成学案上的表格 活动2 比较稀释涂布平板法和显微镜直接计数法 2.稀释涂布平板法操作注意问题 (1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 (2)涂布操作中的注意事项 ①涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧。 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。 (3)同一稀释度的样液加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。 1.选择培养基的类型 类型 条件 分离得到的菌种