2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体（含视频）（教学课件）-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

2.2动物细胞工程 二、动物细胞融合技术与单克隆抗体 什么是动物细胞融合技术？ 单克隆抗体是如何制备的?在临床上有哪些应用？ 本节聚焦 1 2 A细胞 B细胞 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 高Ca2+ —高pH融合法等 脱分化 再分化 移栽 植物细胞融合 植物组织培养 杂种植株 愈伤组织 A原生质体 B原生质体 移栽后的植株 植物体细胞杂交技术 植物体细胞杂交技术的优势： 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育出新的作物类型。　　　　 回顾旧知 实验：人——鼠细胞荧光标记融合实验 融合细胞 细胞 融合 37℃ 40min 正在融合的细胞 红色荧光染料标记膜蛋白 绿色荧光染料标记膜蛋白 人细胞 小鼠细胞 有没有技术能让不同种动物的体细胞杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？　 回顾旧知 1.概念： 2.原理： 3.融合方法： 4.意义： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 细胞膜的流动性 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （化学法、 物理法、 生物法 ） 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段，特别是杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 动物细胞融合特有 杂交细胞：具有原来两个或多个细胞的遗传信息 01 动物细胞融合技术 与诱导植物原生质体融合的方法一样：P37 单核 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力， 但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生 作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核的融合 相关信息 2024/4/1 19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？ 病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。 注意说明 动物细胞融合与受精作用的区别 （1）受精作用：是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。 （2）动物细胞融合可在不同物种间进行，由于物种间存在生殖隔离，所以自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性。 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理方法 诱导细胞融合的方法 细胞融合成功的标志 主要用途 意义 细胞膜具有一定的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性 用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞 物理法：电融合法、离心法； 化学法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法 PEG融合法、电融合法、 灭活病毒诱导法 再生出细胞壁 细胞核的融合 获得完整的杂种植株 主要用于制造单克隆抗体 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 2024/4/1 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较 《金》P55 例1 1.抗体是什么？由什么细胞分泌产生？早期获得抗体的方法及该方法的缺点? 2.在体外培养条件下，如何让一个B淋巴细胞无限增殖? 3.给小鼠注射特定抗原的目的是什么？哪里收集B细胞？ 4.从小鼠体内提取的B淋巴细胞只有一种吗？为什么？ 5.诱导融合后有多少类杂交细胞（只考虑两两融合）？ 6.两次筛选的目的和手段分别是什么？ 7.如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？ 单克隆抗体的制备 二 自主学习P48-P49，小组讨论，解决下列问题： 2.早期获得抗体的方法 向动物体内反复注射某种抗原 →从动物血清中分离所需抗体 产量低、纯度低、特异性差 缺点： 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 单克隆抗体的制备 二 1.抗体的本质是什么？如何产生的？ 浆细胞 抗体(蛋白质） 抗原 B细胞 激活 增殖、分化 ➽若要得到大量的单一抗体，我们该如何去做？ 传统的方法获取抗体 3.制造单克隆抗体 理论基础： 每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。 B淋巴细胞不能无限增殖 克隆单一的B淋巴细胞，得到的细胞群就能分泌出化学性质单一、特异性强的抗体 制备思路： 困难： 单克隆抗体的制备 二 克隆 单克隆抗体 一个已免疫的 B淋巴细胞 体外培养，不能无限增殖 化学性质单一、 特异性强 分泌 英国 米尔斯坦 德国 科勒 由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。 大胆设想