内容正文:
专题训练9(单克隆抗体)
题号
1
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8
答案
D
D
A
B
C
C
C
B
1.D
【详解】A、用NRP-1饲喂小鼠,蛋白质在消化道内水解失去活性,A错误;
B、制备抗NRP-1的单克隆抗体时,首先给小鼠注射NRP-1,从小鼠脾脏中分离得到B细胞,然后可用灭活病毒作促融剂,促使能产生抗NRP-1抗体的B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,B错误;
C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后形成杂交瘤细胞,该杂交瘤细胞既能产生抗NRP-1抗体又能无限增殖,C错误;
D、抗NRP-1的单克隆抗体与NRP-1发生特异性结合后,阻断了血管内皮生长因子与NRP-1的结合,从而抑制了肿瘤内血管生成,肿瘤体积减小而实现靶向治疗,D正确。
2.D
【详解】A、制备单克隆抗体需要将已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,制成杂交瘤细胞,然后进行细胞培养使之产生单克隆抗体,该过程中需要用到动物细胞融合和动物细胞培养技术,A正确;
B、由图可知,该单克隆抗体是利用小鼠制备的,作为生物制剂应用于人体,因为其属于异源蛋白可引起过敏反应甚至危及生命,B正确;
C、由图可知,在①之前向小鼠体内注射ASFV(作抗原),引发小鼠特异性免疫,获得已免疫的B淋巴细胞,由于在此过程中,小鼠还可能接受其他抗原物质刺激,因此从其脾脏中提取的B淋巴细胞有多种,C正确;
D、②代表利用选择培养基进行的第一次筛选,该过程不需要用到ASFV;③代表第二次筛选,即克隆化培养和抗体检测,其中抗体检测需要用到ASFV与克隆化培养的杂交瘤细胞产生的抗体进行抗原-抗体杂交,D错误。
3.A
【详解】A、过程①注射特定抗原的目的是刺激小鼠产生能分泌特定抗体的B淋巴细胞,而不是产生单克隆抗体的细胞,A错误;
B、过程③是将B淋巴细胞(细胞乙)与骨髓瘤细胞(细胞甲)融合,获得的细胞丙是杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖,又能产生特定抗体,B正确;
C、过程④是对杂交瘤细胞(细胞丙)进行克隆化培养和抗体检测,目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,最终得到细胞丁(能产生特定抗体的杂交瘤细胞)。通过克隆化培养可以大量扩增杂交瘤细胞,抗体检测则能确定哪些细胞能产生所需的抗体,C正确;
D、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点,利用其导向功能,可将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞,对某些癌症患者有较好的疗效,D正确。
4.B
【详解】A、抗体偶联药物(ADC)能对肿瘤细胞进行选择性杀伤是因为抗体能与抗原发生特异性结合,未与单克隆抗体偶联的细胞毒性药物没有选择杀伤肿瘤细胞的功能,A正确;
B、制备杂交瘤细胞获取单抗时,产生特定抗体的淋巴细胞不能进行扩大培养,因为该细胞不具有无限增殖能力,B错误;
C、连接子主要作用是连接药物和抗体,要在内环境中保持稳定,避免过早释放毒素,这样才能实现定向对肿瘤细胞的杀伤,C正确;
D、ADC 通常由单克隆抗体、连接子和细胞毒性药物三部分组成,ADC 可与肿瘤细胞表面受体特异性结合,进而实现对肿瘤细胞的定向杀伤,D正确。
5.C
【详解】A、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,使其产生免疫反应,以获得相应的B细胞,从小鼠血清中分离的抗体数量少,不是单克隆抗体,A错误;
B、单个效应B细胞有产生抗体的能力,但没有无限增殖的本领,因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体,B错误;
C、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点,因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断是否感染SARS病毒,C正确;
D、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合,筛选得到其中的杂交瘤细胞有多种,还需进一步筛选才能得到针对SARS病毒的杂交瘤细胞,生产针对SARS病毒的单克隆抗体,D错误。
6.C
【详解】A、过程①从小鼠体内分离得到的是多种抗体,因为人正常乳腺细胞不仅仅提供一种抗原,A错误;
B、过程②使用选择培养基筛选杂交瘤细胞,其物理状态为液体培养基,B错误;
C、单克隆抗体的高度特异性使其能够精准靶向乳腺癌细胞的表面的特定膜蛋白,减少对正常细胞的损伤,提高治疗的靶向性,C正确;
D、该单克隆抗体仅针对特定抗原,无法识别所有癌细胞的标记物,D错误。
7.C
【详解】A、为了诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞,实验前给小鼠甲注射病毒A,可注射灭活的病毒A或减毒的病毒A,有活性的病毒A可能会导致小鼠死亡,A错误;
B、由于小鼠可能接触过多种抗原,因此从小鼠提取的B淋巴细胞有多种,不都能产生抗病毒A的抗体,B错误;
C、筛选1是利用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞,而杂交瘤细胞可能有多种,C正确;
D、筛选2是将杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,筛选出能分泌抗病毒A的抗体,需用特异性抗原(如病毒A)对杂交瘤细胞进行检测,D错误。
8.B
【详解】A、在单克隆抗体制备过程中,灭活的病毒(如仙台病毒)是常用的细胞融合诱导剂,用于促进骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合,A正确;
B、经选择培养基筛选后,由于B细胞有多种,杂交瘤细胞能够产生的抗体有多种,B错误;
C、克隆化培养和抗体检测的目的是筛选出单一克隆的杂交瘤细胞,每个克隆只能产生一种特异性抗体,C正确;
D、利用一种抗原,可以通过杂交瘤技术获得针对该抗原不同表位的多种单克隆抗体,D正确。
9.(1) 不是 用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高
(2)VP1
(3) 灭活的病毒 细胞膜具有一定的流动性
(4) 杂交瘤细胞 克隆化培养 抗体检测 能产生特异性抗体的杂交瘤细胞
(5)特异性强,灵敏度高,可大量制备
【详解】(1)该实验的自变量血清中抗原和抗体的种类,因变量是抗原与抗体结合程度。以抗原为自变量,看第1组血清与其结合情况,第1组血清能结合多种抗原,因此EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体,依据是,用 EV71免疫的小鼠血清的抗体与 VP1和 VP2抗原的结合强度都较高。
(2)制备抗EV71单克隆抗体时,选用VP1免疫的小鼠,牌脏细胞效果最佳,因为第2组血清抗体特异性结合EV71病毒和VP1蛋白相对值较大
(3)在诱导动物细胞融合时,还可以用灭活的病毒,细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。
(4)将其接种到96孔板,进行克隆化培养和抗体检测,目的是为了获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
(5)该单克隆抗体具有的优点是:能准确识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性识别,并且可大量制备,所以单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。
10.(1) 使机体产生更多能分泌抗癌胚抗原的抗体(特定抗体)的B淋巴细胞 动物细胞融合 动物细胞培养
(2) 灭活的病毒 聚乙二醇/PEG 既能大量繁殖,又能产生特异性抗体 5
(3)筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞/筛选产生单克隆抗体的杂交瘤细胞
(4)注射到小鼠腹腔内增殖
【详解】(1)过程①是给小鼠多次注射癌胚抗原,其目的是使机体产生更多能分泌抗癌胚抗原的抗体(特定抗体)的B淋巴细胞。制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养。
(2)过程②细胞融合常用的生物诱导剂是灭活的病毒,常用的化学诱导剂是聚乙二醇(PEG),融合后用特定的 HAT 选择性培养基筛选出的细胞是杂交瘤细胞,既能大量繁殖,又能产生特异性抗体。假设不考虑三个或三个以上细胞的融合,则经过②过程试管内含有5种类型的细胞:B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B淋巴细胞与B淋巴细胞的融合细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞、杂交瘤细胞。
(3)经过程③筛选得到的细胞筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体不一定是单克隆抗体,还需转移至多孔培养板中进行过程④,以便筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞(筛选产生单克隆抗体的杂交瘤细胞)。
(4)获得的单克隆杂交-杂交瘤细胞有两个培养途径,一是在体外条件下培养,二是注射到小鼠腹腔内培养增殖。
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专题训练9(单克隆抗体)
1.神经纤毛蛋白—1(NRP—1)是一种糖蛋白,在多种肿瘤组织中高表达,可与血管内皮生长因子结合促进肿瘤的血管形成,使肿瘤体积增大。科研人员通过制备抗NRP-1的单克隆抗体,开展对小鼠乳腺癌肿块靶向治疗的研究。下列叙述正确的是( )
A.先用NRP-1饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞
B.用灭活病毒处理不能促使产生抗NRP-1抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合
C.诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后形成能产生抗NRP-1抗体但不能增殖的杂交瘤细胞
D.抗NRP--1的单克隆抗体与NRP-1特异性结合,可抑制肿瘤内血管生成
2.非洲猪瘟病毒(ASFV)是一种具有包膜的双链DNA病毒,病毒蛋白p30位于病毒的包膜上,在病毒进入宿主细胞时期具有重要作用。科研人员设计如下流程制备ASFV单克隆抗体。下列叙述错误的是( )
A.该流程利用了动物细胞融合和动物细胞培养技术
B.该单克隆抗体直接用于人体可能会引起过敏反应
C.①是从免疫小鼠脾脏中提取的多种B淋巴细胞
D.②和③所进行的两次筛选过程都不需要用到ASFV
3.抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一,其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起,可特异性地杀死患者体内的癌细胞,如图。错误的是( )
A.过程①注射相同的特定抗原的目的是生成能产生单克隆抗体的细胞
B.过程③获得的细胞丙的特点是既能无限增殖,又能产生抗体
C.过程④对细胞丙进行克隆化培养和抗体检测,最终得到细胞丁
D.利用单克隆抗体的导向功能可对某些癌症患者有较好的疗效
4.科学家构建抗体-药物偶联物(ADC)对肿瘤细胞进行选择性杀伤,ADC 通常由单克隆抗体、连接子和细胞毒性药物三部分组成,如图。错误的是( )
A.未与单克隆抗体偶联的细胞毒性药物不能选择杀伤肿瘤细胞
B.制备杂交瘤细胞获取单抗时,产生特定抗体的淋巴细胞需要先进行扩大培养
C.连接子主要作用是连接药物和抗体,要在内环境中保持稳定,避免过早释放毒素
D.ADC 可与肿瘤细胞表面受体特异性结合
5.科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。叙述正确的是( )
A.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,目的是从小鼠血清中分离出单克隆抗体
B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C.利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒
D.将小鼠的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞诱导融合,筛选得到其中的杂交瘤细胞即可用于生产针对SARS病毒的单克隆抗体
6.人正常乳腺细胞与人乳腺癌细胞表面有部分相同的膜蛋白。为生产针对人乳腺癌细胞的单克隆抗体,基本流程如图所示。下列叙述正确的是( )
A.过程①从小鼠体内分离得到的是一种抗体
B.过程②使用固体培养基筛选杂交瘤细胞
C.该单克隆抗体可提高乳腺癌治疗的靶向性
D.该单克隆抗体可检测各种癌细胞
7.为研制抗病毒A的单克隆抗体,某科研团队以小鼠为实验材料设计以下实验。正确的( )
A.实验前必需对小鼠注射活性病毒A
B.图中B淋巴细胞均能产生抗病毒A的抗体
C.可能有多种杂交瘤细胞在筛选1的培养基上生长
D.筛选2需用特异性抗体对杂交瘤细胞进行检测
8.抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团,是抗原与T细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体特异性结合的最小结构单位。下图为单克隆抗体的制备过程,下列叙述错误的是( )
A.可用PEG或灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合
B.经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体共3种
C.克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体
D.由图可知,利用一种抗原经杂交瘤技术可以获得多种单克隆抗体
9.EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。一、抗原的选择和制备:将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内,多次免疫后,取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如图所示。
(1)EV71免疫的小鼠血清抗体 (填“是”或“不是”)单一抗体,判断依据是 。
(2)制备抗EV71单克隆抗体时,选用 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。
二、单克隆抗体的制备,流程图如下:
(3)植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备,都应用了细胞融合技术,电激和聚乙二醇都可以诱导相应的细胞融合,在诱导动物细胞融合时,还可 以用 。细胞融合的原理是 。
(4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得 。将其接种到96孔板,进行 和 ,目的是获得 。
(5)与传统抗体相比,单克隆抗体的优点是 。
10.双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的 B 细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的部分过程。分析回答:
(1)过程①注射癌胚抗原一般需多次注射,目的是 ,制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有 、 。
(2)过程②细胞融合常用的生物诱导剂是 ,常用的化学诱导剂是 ,融合后用特定的 HAT 选择性培养基筛选出的细胞的特点是 。假设不考虑三个或三个以上细胞的融合,则经过②过程试管内含有 种类型的细胞。
(3)经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④,目的是 。
(4)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或 ,均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。
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