内容正文:
二、微生物的培养技术及应用
微生物
2.种类:
酵母菌
青霉菌
大型真菌
球菌
蓝细菌
草履虫
衣藻
禽流感病毒
SARS病毒
1.微生物的概念:
_________________________的统称。
难以用肉眼观察的微小生物
微生物
本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。
沙门氏菌
微生物在培养基上大量繁殖时,形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。
菌落
毛霉
①要为人们需要的微生物提供合适的___________条件。
营养和环境
微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。
实验室培养微生物的条件
——培养基
培养基
1. 概念:
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.营养成分:
① 碳源
凡是能提供碳元素的物质
自养生物:
异养生物:
CO2等含碳无机物
含碳有机物
凡是能提供氮元素的物质
固氮微生物:
非固氮微生物;
空气中的氮气等无机氮
氨基酸、蛋白质、尿素等含氮有机物
② 氮源
(1)基本成分:
碳源、氮源、水、无机盐
注:牛肉膏、蛋白胨是异养型微生物的碳源、氮源、能源
表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
①提供无机营养;
②调节pH;
③维持渗透压。
③ 水
④ 无机盐
培养基经常使用有:K2HPO4 MgSO4 NaCl Ca(NO3)2 FeSO4
微生物例子 培养基需要的特殊物质或条件
乳酸杆菌
霉菌
细菌
厌氧微生物
添加维生素
调至酸性
调至中性或弱碱性
提供无氧的条件
培养基的特殊需求
(2)还需满足微生物对 pH、特殊营养物质、氧气的需求
生长因子、维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等
3.类型:
固体
培养基
液体
培养基
有无琼脂
分离、计数、
鉴定等
扩大培养、
工业生产
按功能分:
选择培养基:
具有只允许特定的微生物生长,而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。
按物理性质分:
例如:
1.以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌
2.不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物
3.培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
4.培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
例如:伊红--美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌
其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸,菌体带H+故菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽,在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不能结合。
4、培养基作用:
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、
分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
天然培养基
合成培养基
鉴别培养基
3.培养基的类型及用途:
二.无菌技术
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染
11
自学指导:阅读课本P10—P11 5分钟
1、无菌技术有哪些?如何区分消毒和灭菌?
2、常用的消毒方法有哪些?这些消毒方法的适用范围是什么?
3、常用的灭菌方法有哪些?这些灭菌方法的适用范围是什么?
以下物品所采用的灭菌或消毒方法依次是
培养基
培养皿
接种环
实验操作者的双手
实验室
牛奶
高压蒸汽灭菌
干热灭菌
灼烧灭菌
化学消毒(酒精)
紫外线消毒
巴氏消毒法
任 务 活 动
类型 适用范围 操作方法
消
毒
较为温和理化生方法,杀死部分微生物和部分芽孢、孢子
煮沸消毒法
日常生活
100 ℃煮沸5~6min
巴氏消毒法
不耐高温的液体
62~65℃消毒30min或80~90℃消毒30s~1min
化学药物消毒法
生物活体、水源等
用酒精擦拭双手、
用氯气消毒水源
紫外线照射消毒法
紫外线照射30min
接种室、接种箱,
超净工作台。
二、无菌技术
1.消毒
适用:实验操作的空间、操作者的衣着和手(和培养的微生物不直接接触)
4.原理: