内容正文:
默写
1.诱导植物细胞融合的具体方法?(物理法和化学法各写1个)
2.培育脱毒苗时,取材部位是植物的顶端分生区附近,为什么?
3.脱毒苗能抗病毒吗?
4.次生代谢物是细胞生长所必需的吗?本质是?
回答:
1.植物体细胞杂交的概念?优势?
2.二倍体和四倍体细胞融合后经植物组织培养得到的杂种植株属于几倍体?育种原理是?
3.花药离体培养得到的植株是几倍体?
4.想大量获得植物的次生代谢物,怎么办?
第2节 动物细胞工程
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合
生产单克隆抗体
动物细胞工程
是最基础的技术
2min
皮肤的自体移植
灰绿色
小面积烧伤:患者通过切除 + 植皮(自身)后恢复
1)使用他人皮肤如何?
患者自身皮肤的不够用,如何解决?
大面积烧伤?
2)培养自身细胞?
目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤。
从社会中来
1、概念:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
2、目的:
获得细胞或细胞产物(不能获得完整动物个体)
3、原理:
细胞增殖(有丝分裂)
4、培养对象:
那么,获得这些细胞或细胞产物的培养条件和具体过程又是怎样的?
动物细胞培养
胚胎或幼龄动物细胞
幼龄个体的细胞分化程度低,分裂能力强,易培养
6
一、动物细胞培养的条件
为使动物细胞培养顺利进行,应满足哪些条件?
阅读p43-44
7
糖类、氨基酸、
无机盐、维生素
… …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
+
合成培养基
血清
人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分。
培养动物细胞一般使用液体培养基,也称培养液。
一
一、动物细胞培养的条件
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。
如何维持无菌、无毒的环境?
适宜的温度、pH和渗透压分别是多少?
适宜的气体环境指?分别有什么作用?如何保持该气体环境?
对培养液和所有培养用具进行灭菌处理并在无菌环境下操作
定期更换培养液:清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
温度:(36.5±0.5)℃; pH:7.2-7.4 ;适宜的渗透压
95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱;
O2是细胞代谢所必需的,CO2的作用是维持培养液的pH;
细胞培养时,采用培养皿或松盖培养瓶。
一
一、动物细胞培养的条件
思考讨论
二、动物细胞培养的过程
任务:阅读教材P44-45并结合动物细胞培养的定义,用关键词和箭头表达出一般过程。
10
一
动物细胞培养过程
用机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理
原代培养
加培养液 制成细胞悬液在培养皿 或培养瓶内
悬浮生长
贴壁生长
(大多数)
④接触抑制
细胞分裂受阻
解决
传代培养
分瓶培养
取动物组织
分散成单个细胞
②制成细胞悬液
①收集细胞
悬浮细胞:直接用离心法收集
贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞,用离心法收集
①细胞密度过大、
②有害代谢物积累、
③营养物质缺乏等
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动物细胞培养的过程——重要名词解释
1.细胞贴壁
2.接触抑制
3.原代培养
4.传代培养
为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?
细胞贴附在培养瓶的瓶壁上的现象
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。
动物组织经处理后的初次培养
分瓶后的细胞培养
细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖;
细胞悬液
细胞贴壁、接触抑制
单层细胞
多层细胞
课后作业
1.动物细胞培养需要加入哪种天然成分?
2.培养液定期更换的原因?
3.动物细胞培养的气体环境是怎样的?O2和CO2的作用是?
4.用什么方法将动物细胞分散成单个?
5.传代培养时,如何收集细胞?
6.动物细胞培养的目的是获得?
优佳学案
P39 【思考】【应用】
进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
说明细胞间的物质主要是蛋白质。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃蛋白酶不行。
思考讨论p44
注意处理时间和酶的用量,以防对细胞造成损伤。
1.幼龄动物的细胞和老龄动物的细胞比较,分化程度低的和分化程度高的细胞比较,哪些细胞更容易培养?为什么?
2.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同和不同之处?
思考讨论p45
幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞,因为这些细胞分裂能力强
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取动物组织
胰蛋白酶等
原代培养
传代培养
分散成单个细胞
加培养液,制成细胞悬液
离体的植物器官、组织或细胞
愈伤组织
芽、根
植物体
脱分