内容正文:
二、植物体细胞杂交技术
课前提问
胰蛋 白酶 处理
取动物组织
分散成单个细胞
细胞悬液
加培养液
转入培养液中进行培养
离心法收集细胞并制成细胞悬液
原代培养
分裂受阻
转入新的培养液中进行培养
传代培养
分瓶培养
第2章 细胞工程
本节聚焦:
什么是动物细胞融合技术?
单克隆抗体是如何制备的?
在临床上有哪些应用?
第2节 动物细胞工程
(二)动物细胞融合和单克隆抗体
(2课时)
植物体细胞杂交
植物细胞融合
植物组织培养
温故知新:
植物体细胞杂交技术
打破生殖隔离,克服远缘杂交不亲和障碍,培育出新的作物类型。
从社会中来
运用植物体细胞杂交技术,可培育新的作物类型
那么,能不能让不同种动物的体细胞进行杂交,培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢?
实例:1970年,人—鼠细胞荧光标记融合实验
人细胞
鼠细胞
红色荧光染料标记的膜蛋白
绿色荧光染料标记的膜蛋白
细胞融合
人鼠杂交细胞
37°
培养40min
细胞融合
实验表明:细胞膜具有流动性
有没有技术能让不同种动物的体细胞杂交?
思考:动物细胞进行融合,与植物有哪些不同之处?
无需去除细胞壁;
全能性受限制,不能培育成新的动物个体。
显微镜下的
动物细胞融合
动物细胞融合
概念
原理
诱导方法
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
细胞膜具有一定的流动性
物理法:电融合法
化学法:聚乙二醇(PEG)
生物法:灭活病毒诱导法
一、动物细胞融合技术
动物细胞融合特有的诱导方法
思考:灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么呢?
灭活:是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。
原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝集,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
动物细胞融合完成的标志
动物细胞融合
结果
意义
运用
形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞
突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。
第一
第二
第三
为制造单克隆抗体开辟了新途径。
研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
至今,种间、属间、科间,甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。
一、动物细胞融合技术
植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
细胞融合前的处理方法
诱导细胞融合的方法
细胞融合成功的标志
主要用途
意义
细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性
细胞膜具有一定的流动性
用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞
电融合法、离心法;聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法
PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法
再生出细胞壁
细胞核的融合
获得完整的杂种植株
主要用于制造单克隆抗体
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种
突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
植物体细胞杂交和动物细胞融合比较
(1)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒( )
(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构( )
(3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞( )
×
√
判断下列正误
×
这个场景大家再熟悉不过了
出外做核酸太麻烦,在家如何确定自己是否“阳”了?
单克隆抗体
血清
(抗体主要分布部位)
传统抗体制备方法:
向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。
缺陷:
产量低、纯度低,特异性差
血清含量有限
(一)传统抗体制作方法及缺陷:
二、单克隆抗体及其应用
单克隆抗体:由单一B淋巴细胞克隆(增殖)的细胞群产生的特异性抗体。
如何得到能产生抗体且增殖能力强的细胞?
思考与讨论
单克隆抗体
分析概念中“单”和“克隆”的含义。总结单克隆抗体的概念?
二、单克隆抗体及其应用
病原体
处理
呈递
辅助性T细胞
结合
记忆B细胞
浆细胞
抗体
第一信号
分裂、分化 并分泌
细胞因子
分裂分化
促进
产生分泌
第二信号
B细胞
抗原呈递细胞
结合
抗体与病原体结合后形成沉淀等,进而被其他免疫细胞吞噬消化。
摄取
知识回顾:抗体的产生
抗体1
抗体2
抗体3
抗体4
…….
动物体内产生的特异性抗体的种类超过百万种
抗原1
抗原2
抗原3
抗原4
B细胞1
B细胞2
B细胞3
B细胞4
…….
每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
刺激
刺激
刺激
刺激
(一)传统抗体制作方法及缺陷:
二、单克隆抗体及其应用
抗体1
抗体2
抗体3
抗体4
…….
动物体内产生的特异性抗体的种类超过百万种
抗原1
抗原2
抗原3
抗原4
B细胞1
B细胞2
B细胞3
B细胞4
…