2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第二章第2节(二) 动物细胞融合技术与单克隆抗体 新课程标准 核心素养 1.举例说出动物细胞融合的概念、原理及应用。 2.阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。 3.认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。 1.生命观念——以细胞的结构与功能为基础，理解动物细胞融合的内涵；并正确理解植物体细胞杂交与动物体细胞融合技术的区别。 2.科学思维——结合具体实例，以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。 植物体细胞杂交 植物细胞融合 植物组织培养 温故而知新 植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新的作物类型。 请同学们快速阅读课本P48页回答以下问题 1. 什么是动物细胞融合技术（概念）？原理是什么？ 2. 所形成的杂种细胞有什么特点？ 3. 诱导动物细胞融合的方法有哪些？ 4. 动物细胞融合技术的意义和应用有哪些？ 三、动物细胞融合技术 1.概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2.结果： 形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 3.原理： 细胞膜的流动性 4.诱导融合的常用方法： 化学方法：如聚乙二醇（PEG）诱导融合法。 物理方法：如电融合法、离心、振动等。 生物方法：如灭活病毒诱导法（仙台病毒应用最广泛）。 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合） （1）“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？ 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （2）灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？（书本P48） 5.过程： 动物细胞融合 动物细胞培养 动物细胞融合完成的标志： 动物细胞融合成功的标志： 两个或多个细胞核融合成 一个细胞核 杂交细胞进行有丝分裂 7.应用： （1）细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 （2）利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 6.意义： 突破了有性杂交的局限，使远缘（种间、属间、科间、动植物之间）杂交成为可能 血型检测试剂 3.动物细胞融合属于动物细胞工程的技术手段之一。下列有关动物细胞融合的叙述,正确的是(　　) A.动物细胞融合产生的细胞称为重组细胞 B.融合后形成的细胞为单核或多核细胞 C.常用的诱导融合的生物诱导剂是聚乙二醇、灭活病毒等 D.细胞融合也称细胞杂交,可由两个或多个动物细胞结合形成一个细胞 书本P51：概念检测1 D 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 基本原理 融合前处理 诱导方法 用 途 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、果胶酶去壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散 培育新品种 例如：制备单克隆抗体 物理法：电融合法、离心法 化学法：PEG， 高Ca2+ —高PH融合法 电融合法，PEG融合法，灭活的病毒 植物体细胞杂交和动物细胞融合比较 02 单克隆抗体的制备 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一B细胞 不能无限增殖产生大量抗体 传统抗体制备方法及缺陷 缺陷： 产量低、纯度低， 且抗体的特异性差、灵敏度低。 如何解决这个问题呢？ 活动２:阅读P48并思考： 科学家发现B淋巴细胞有什么特点？ 怎样才能获得大量的单一抗体？ 体外培养时，一个B淋巴细胞不能无限增殖 问题１：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的 问题２：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力 和无限增殖能力同时具备 科学家发现：１.体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上 　　　　　　　２.每个B细胞只分泌一种特异性的抗体 单 克 隆 抗 体 克隆 一个 B淋巴细胞 细胞群 抗体 遗憾： 癌细胞 动物细胞融合 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 动物细胞融合 动物细胞培养 单克隆抗体 杂交瘤细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 阅读课本P49-50,了解单克隆抗体的制备过程 一个大胆的猜想 1975年，米尔斯坦和柯勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖 14 问题：我们所学的哪种细胞能够无限增殖？/有什么方法能使B淋巴细胞也具有这样的能力？（诺贝尔生理学奖或医学奖） ①未融合的细胞②多种杂交细胞 杂交瘤细胞 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞（能产生特定抗体的杂交瘤细胞） 用特定的选择培养基 第一次筛选 克隆化培养、抗体检测 第二次筛选（可进行多次） 注射到小鼠腹腔内 体外