2024届高三生物一轮复习选择性必修3：微生物的培养技术及应用

第2课时 微生物的培养技术及应用 课标要求 1.获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。 2.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的基础。 3.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品和无菌区域不被微生物污染的技术。 4.举例说明通过调整培养基的配方可有目的的培养某种微生物。 5.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。 6.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 1.培养基的配制 (1)培养基概念、用途和类型 1.培养基的配制 ①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 ②用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 分类 标准 培养基 种类 特点 用途 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂。 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离与鉴定、活菌计数、保藏菌种 化学 成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 用已知的成分配制 分类、鉴定 功能 选择培养基 根据某种微生物的特殊营养要求配置 培养、分离出特定微生物 鉴别培养基 加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 ③种类 牛肉膏蛋白胨培养基(肉汤培养基)——培养细菌 马铃薯琼脂培养基——培养真菌（如酵母菌） MS培养基——植物组织培养 补充：2.常用的3种培养基 (2)培养基的营养成分 营养物质 含义 作用 主要来源 碳源 能提供碳元素的物质 构成生物体的物质，异养生物的能源物质 无机碳源：CO2、NaHCO3 有机碳源：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等 氮源 能提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物 无机氮源：N2、NH3、氨盐、硝酸盐； 有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 1.培养基的配制 ①各培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等。 思考：什么情况下用有机碳源/无机碳源？ 什么情况下用有机氮源/无机氮源？ ②此外，还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的需求。 (2)培养基的营养成分 1.培养基的配制 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊需求 添加维生素 pH调至酸性 pH调至中性或弱碱性 无氧 下列相关叙述正确的是（ ） A．从培养基组成来看，该培养基属于固体培养基 B．从培养基的pH分析该培养基可用于培养霉菌 C．去掉（NH4）2SO4，该培养基可用于选择培养固氮微生物 D．微量元素在生物体中含量很少，培养基中可以不加或少加 C 下表是某同学设计的一种培养基配方，下列有关分析正确的是（　　） A．该培养基中不含碳源，不能用于培养任何微生物 B．此配方制作固体培养基，可用于选择培养异养的固氮微生物 C．若需筛选耐酸的微生物，需要培养基灭菌后通过滴加盐酸来调节pH D．若需筛选分解尿素的细菌，需去除硝酸钠，添加尿素和葡萄糖 D (1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 (3)pH要适宜：培养不同微生物所需的pH不同。 补充：1.培养基配制的原则 1 . 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述错误的是（ ） A．制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂 B．培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素 C．培养霉菌时需要将培养基调至碱性 D．对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌 C 2.无菌技术 2.无菌技术 (1)目的：获得纯净的微生物培养物。 (2)关键：防止杂菌污染。(3)消毒与灭菌的比较 项目 消毒 灭菌 作用强度 较为温和的理化因素 强烈的理化因素 作用程度 杀死物体表面或内部一部分微生物 杀死物体内外的所有微生物 芽孢和孢子 一般不能杀灭 能杀灭 适用对象 实验操作的空间、操作者衣着和双手 微生物培养器皿、接种用具和培养基等 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法等 湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法等   常用方法 处理措施 应用范围 消毒 煮沸消毒法 100℃煮沸5~6min 日常用品 巴氏消毒法 62-65℃煮30min 或80-90℃煮30s~1min 不耐高温的液体，如牛奶 （杀死大部分微生物，不破坏液体营养成分） 化学药剂消毒法 化学药物处理 用70%酒精擦拭双手， 用氯气消毒水源 紫外线消毒法 紫外线照射30min (照射前适量喷洒消毒液) 接种室、接种箱、超净工作台 灭菌 灼烧灭菌法 酒精灯火焰充分灼烧 接种工具，试管口、瓶口等 干热灭菌法 干热灭菌箱160~170