2.2 动物细胞工程动物细胞培养（第1课时 ）课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

首例胚胎移植成功 首创动物组织体外培养法 发现哺乳动物精子获能现象 体细胞核移植成功 试管家兔诞生 创立单克隆抗体技术 胚胎分割移植成功 分离和培养小鼠胚胎干细胞 克隆羊多莉诞生 获得诱导多能干细胞 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。 1890年 1907年 1951年 1958年 1959年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 动物细胞工程（含胚胎工程）发展历程 思考：怎样获得大量自体健康皮肤？能否用自体皮肤细胞培养出可移植皮肤？ 可从病人身上取少量正常健康皮肤在体外培养、扩增。这里涉及到动物细胞工程很多技术！ 江西生物组 东东老师 学习目标： 1．阐明动物细胞培养的条件和过程。 2．简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。 3．阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程,认同单克隆抗体在临床上有重要的 应用价值。 4．阐明利用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和该技术的应用前景。 第2章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的条件 动物细胞培养：从动物体中取出相关的组织或器官（胚胎或幼龄动物的细胞，细胞分化程度低、分裂能力强，易培养），将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 思考：动物细胞培养需要哪些必要的条件？培养的过程又是怎样的呢？ 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞工程的基础 动物细胞工程技术 克隆动物 动物细胞培养所需基本条件 其他环境条件 营养条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素…… 无菌、无毒的环境； 适宜的温度、pH和渗透压； 适宜的气体环境。 4 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的条件-营养 1．营养 ①已知成分:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。称为合成培养基。 ②未知成分：使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。血清中含有人类尚未全部研究清楚、细胞生长和增殖所必需的物质。 + 合成培养基 10%～20%的血清 注意：培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。 血清中不仅含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种营养物质，还有激素及多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 天然培养基 水、糖类（葡萄糖）、氨基酸、无机盐、维生素……将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。天然培养基：由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时，通常需加入血清和血浆等一些天然成分。 5 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的条件-无菌、无毒的环境 2．无菌、无毒的环境 无菌 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 定期更换培养液，以便清除代谢物 无毒 （防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害） ①湿热灭菌 ②干热灭菌 ③灼烧灭菌 培养的细胞一旦被污染，多数无法挽回，需尽快弃之，以防止污染扩大而影响其他细胞。 在培养基中加入抗生素也能抑制细菌和真菌的生长，从而预防污染。 有毒物质 维持适宜渗透压的目的 。 哺乳动物细胞培养的温度多以 为宜； 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的条件-温度、pH和渗透压 3．温度、pH和渗透压 多数动物细胞生存的适宜pH为 。 ①适宜的温度： 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 维持细胞正常的形态和功能 ②适宜的pH： ③适宜的渗透压： 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的条件-气体环境 4．气体环境 动物细胞培养所需气体主要有___和____。 O2 CO2 CO2培养箱 通常采用培养皿或松盖培养瓶。并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 O2：细胞代谢所必需的。 CO2：主要作用是维持培养液的pH。 培养箱不仅能提供气体环境，还提供了适宜的温度，还能控制稳定的pH环境。 造成培养基pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2 ，为了解决这一问题，可采用开放式培养的方式，使细胞代谢产生的CO2 及时溢出培养器皿，再通过给培养箱提供恒定的5%的CO2 浓度，使之与培养基中的NaHCO 3 处于平衡状态，调节pH的相对稳定。95%的空气可以保证细胞呼吸对氧气的需要。 动物细胞培养过程中，培养基中一般会加