内容正文:
根、芽
植物体
再分化
培养条件:①无菌②营养物质③适宜条件(温度、PH、光等)
④植物激素:
遮光避免维管组织形成
光照
芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照
脱分化
愈伤组织
离体的植物器官、组织或细胞(外植体)
愈伤组织重新分化为芽、根等器官
失去特有结构和功能转变成未分化的细胞
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键。生长素和细胞分裂素的比例和浓度会影响植物细胞的发育方向。
如:胡萝卜的形成层、菊花幼茎段、月季的花药…
排列不规则,高度液泡化,呈不定型状态的薄壁细胞
上节回顾
番茄—马铃薯杂种植株设想图
思考:传统有性杂交方法能实现吗?为什么?科学家是怎样得到杂种植株的?
不能,因为两种生物之间存在着天然的生殖隔离;植物体细胞杂交技术。
【小组合作】阅读教材P36-38,结合图2-4,小组讨论解决下列问题:
①为什么要去除细胞壁?用什么方法可以去除细胞壁?上述酶溶液中一般加入一定浓度的无机盐离子和甘露醇,试分析原因?
②诱导原生质体融合的原理是什么?方法有哪些?融合完成的标志是什么?
③获得的所有细胞一定是需要的杂交细胞吗?有哪些类型?
④植物体细胞杂交技术应用了哪两种技术?对应的原理是什么?
去除细胞壁的植物细胞是否需要保证渗透压稳定?需要,可以加入山梨醇和甘露醇来稳定渗透压!防止细胞吸水涨破或失水皱缩。
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①去壁原因: 。
②方法: 。③相关酶溶液: 。
细胞壁阻碍着细胞间的杂交(阻碍了原生质体间的融合)
酶解法
纤维素酶和果胶酶溶液
(1)去除细胞壁
①为什么要去除细胞壁?用什么方法可以去除细胞壁?
①上述酶溶液中一般加入一定浓度的无机盐离子和甘露醇,试分析原因?
使溶液有一定的渗透压,防止原生质体吸水过多而涨破
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
(2)人工诱导原生质体融合
②方法:
①理论基础:
②诱导原生质体融合的原理是什么?方法有哪些?融合完成的标志是什么?
融合的原生质体重新产生细胞壁,形成杂种细胞
(3)细胞融合完成的标志
细胞膜具有流动性
物理方法:
化学方法:
电融合法、离心法
聚乙二醇(PEG)融合法、
高Ca2+-高pH融合法
使用方便,融合频率高
缺点:有一定的毒性对某些细胞不适用(如卵细胞)
对细胞无毒害作用,操作简便,可重复性好
优点
优点
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
植物细胞融合完成的标志
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
若只考虑两两融合
③获得的所有细胞一定是需要的杂交细胞吗?有哪些类型?
不一定,有三类:
①未融合的细胞
②两两融合的细胞
③多细胞融合体
AA
AB
BB
筛选
AB
(2)人工诱导原生质体融合
(3)植物组织培养技术
原生质体融合技术的原理是: ;
植物组织培养技术的原理是: 。
思考:基于植物体细胞杂交技术流程,概括植物体细胞杂交技术及其优缺点。
去壁
去壁
融
合
再生
新壁
脱分化
再分化
移栽
植物细胞融合技术
植物组织培养技术
A细胞
A原生质体
B细胞
B原生质体
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
愈伤组织
杂种植株
④植物体细胞杂交技术应用了哪两种技术?对应的原理是什么?
细胞膜的流动性
植物细胞的全能性
植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
优点
打破远缘亲本杂交生殖隔离,扩展杂交亲本组合范围。
缺点
有可能杂交不成功,即使杂交成功也可能不产生人们想要的性状。
番茄-马铃薯(想象图)
(二)植物体细胞杂交技术
思考:“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想象的那样,地上长番茄、地下结马铃薯的主要原因是?
生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以番茄—马铃薯杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,不能像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达
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细胞壁
细胞膜
细胞质
液泡
细胞核
指的是脱去细胞壁的细胞。动物细胞也可看做是原生质体。
原生质体