常考大题一题8练(5)生物技术与工程B组-【衡水金卷·先享题】2024年高考生物专项提分卷（新教材）

常考大题一题8练(5)】 生物技术与工程B组 (限时25分钟，满分40分) 1.(10分)幽门螺杆菌(Hp)是一种螺旋状、微需氧的 其依据是 致病菌，对万古霉素（抗生素）不敏感，对青霉素 (抗生素)高度敏感，其危害主要是引起胃炎、胃遗 2.(9分)油菜是我国重要的油料作物，黄籽油菜比黑 疡甚至胃癌等，体检时可通过C尿素呼气实验来 籽油菜的含油量更高，色索积累更少，但我国主栽 检测幽门螺杆菌的感染情况。：研究人员利用消化 的甘蓝型油菜缺乏天然的黄籽种质资源。研究表 道溃疡患者胃活组织标本进行了Hp临床菌株的 明，TT8基因作为一个重要的基因参与了黄籽性 分离和培养，所用的培养基配方如下。 状的形成。科研人员首次利用CRISPR/Cas9技 ①制取心脑浸液琼脂培养基：称取23.5g心脑浸 术对甘蓝型油菜中的BnaTT8基因进行定点突变 液溶解在500mL蒸馏水中，加入适量琼脂煮沸至 改造（如图I),PCR扩增BnaTT8基因，构建基因 完全溶解，121℃高压灭菌15分钟。取出自然冷 表达载体（如图2），再将重组质粒通过农杆菌转化 却至50℃，加人2mL幽门螺杆菌选择剂（万古霉 法导入受体甘蓝型油菜甲9707(J9707)中，创建甘 素5mg、头孢磺啶2.5mg、磺胺增效剂2.5mg、 蓝型油菜黄籽突变体，CRISPR/Cas9介导的 两性霉素B2.5mg,溶于2mL无菌蒸馏水中)， BnaTT8基因突变可以显著提高种子的含油量和 再加入35mL.(7%)脱纤维羊血。 蛋白质含量，使得用甘蓝型油菜种子生产的菜籽 ②制取心脑浸液液体培养基：称取0.37g心脑浸 油营养价值更高。请回答下列问题： 液肉汤于50mL.的小烧杯中，再加入10mL蒸馏 Cas9蛋白 BnaTT8 水，用玻璃棒搅拌均匀。 回答下列问题： 识别序列 (1)上述心脑浸液琼脂培养基，从物理性质上属于 向导RNA mmmt mmmt-8A0778 培养基：心脑浸液液体培养基培养 图1 的主要目的是 启动子 (2)心脑浸液琼脂培养基上采用 法 纯化培养得到单菌落。菌落是指 终止子 御霉素」 T-DNA- 抗性基因 卡那荷素 (3)若要研究幽门螺杆菌的生长规律，可挑取单个 抗性基因 菌落进行液体培养，培养过程需设置好培养条件， 图2 (1)图1中向导RNA与BaTT8基因按照 摇床培养24小时，振荡速度保持80~130r/min 的目的是 原则特异性结合，Cas9蛋白切割 。 培养液中加 入万古霉素的目的是 BnaTT8基因使a链和互补链中的 (4)幽门螺杆菌能分解尿素形成氨和二氧化碳，受 断裂，通过随机增添、删除或替换部分碱基对，获 试者口服“C标记的尿素胶囊后，检测收集受试者 得所需目的基因。 气体，可作为诊断幽门螺杆菌 (2)PCR扩增目的基因的原理是 呼出的 的指标。医院针对幽门螺杆菌的常用治疗方案是 ,需要根据所需的BaTT8基因设计引 连续服用青霉素2周，至放射性检测阴性后停药， 物，引物在DNA复制中的作用是 生物学（新教材）第44页（共5A页） 。为保证BnaTT8基因正确插人质粒 (1)研究者进行PCR扩增前根据epEGF基因设 中，需要在引物的 (填 计了一对引物，据图a分析，该对引物序列的设计 “3'端”或“5端”)添加限制酶的识别序列。 要求是 (3)图2中A~E表示不同限制酶的切割位点，构 和 建基因表达载体时，将BnaTT8基因插入 (填字母)处，目的是 实验中常用电泳技术鉴定目的基因，图©电泳结 重组质粒导入受体细胞后，可在个体水 果中样品 (填“1”或“2”)对应的条带为 平上通过 来鉴定BnaTT8 epEGF基因的鉴定结果 基因是否表达。 (2)转化大肠杆菌后进行筛选时，可将其接种在培 (4)基于CRISPR/Cas9系统强大的精确编辑植物 养基①上培养（图d),再利用灭菌的绒布在培养基 基因组的能力，CRISPR/Cas9基因编辑技术已经 ①上印模，沾上潮落后转印至培养基②上培养。 成为农业中一个强有力的工具，科研人员在 根据培养结果可知， 号菌落是成功 CRISPR/Cas9的基础上进行改造，开发出了可以 转化的大肠杆菌，可挑出进一步接种到培养液中 精准实现多种碱基替换和大片段插入和删除的基 进行克隆化培养，培养过程中需在适宜转速的摇 因编辑工具。请写出CRISPR/Cas9及其改造的 床中进行，原因是 产品在科学研究中的应用： (答出一点即可)。 (3)该实验过程使用的质粒A含有GST标签（谷 3.(9分)人表皮生长因子(hEGF)能够促进表皮细胞 胱甘肽S转移酶)基因，已知谷胱甘肽(GSH)是 生长，对皮肤相关疾病及刺激性食物导致的胃肠 GST作用的底物，研究人员将菌体破碎离心后取 遗疡具有修复治疗价值。已知细胞穿膜肽P©p1