内容正文:
第2节 基因工程的基本操作程序
第3章 基因工程
普通棉花
转基因抗虫棉
将苏云金杆菌中的Bt抗虫蛋白基因转入普通棉花
从社会中来
1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年,我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个,减少农药用量40万吨,增收节支社会经济效益450亿元。你知道转基因抗虫棉抗虫的机制是什么吗?培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤?
苏云金杆菌
目的基因的筛选与获取
基因表达载体的构建
将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
转基因抗虫棉培育过程
有了目的基因,我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可进行遗传、表达和发挥作用
(核心)
基因工程的基本操作程序
1. 目的基因的筛选与获取
2. 基因表达载体的构建
3. 将目的基因导入受体细胞
4. 目的基因的检测与鉴定
载体进入受体细胞稳定表达,才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化
才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达
一、目的基因的筛选与获取
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一、目的基因的筛选与获取
(2)根据不同的需要,目的基因是不同的,它主要是指编码蛋白质的基因,如与生物抗逆性、生产药物、毒物降解、工业用酶等相关的基因。
1. 目的基因
(1)概念:在基因工程的设计和操作中,用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因就是目的基因。
(3)实例:苏云金杆菌可以分泌一种苏云金杆菌伴孢晶体蛋白(Bt抗虫蛋白),对鳞翅目昆虫有很强的杀伤作用。科学家通过实验将编码该蛋白质的Bt抗虫蛋白基因转到棉花里,棉花也能产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。
1. 目的基因
Bt抗虫蛋白基因(简称Bt基因)是培育转基因抗虫棉的目的基因。
一
第一步:目的基因的筛选与获取
注意: 所有的基因都编码蛋白质或肽链。
基因的种类一般分为结构基因、转录基因和调控基因。
结构基因的功能:
具有转录和翻译功能,能控制生物性状(编码蛋白质或肽链)。
转录基因的功能:
只有转录功能,没有翻译功能,能转录形成tRNA和rRNA。
调控基因的功能:
不能进行转录和翻译,只能调控其他基因的表达。
知识拓展:基因
不是
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基因1 基因2 基因3
知识拓展:基因的结构
DNA片段
放大
基因通常是有遗传效应的DNA片段;
能编码特定的蛋白质
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
能转录相应的mRNA,进一步编码(翻译)出蛋白质的DNA区段
不能转录为相应的mRNA,不能编码蛋白质的区段
不能转录为相应的mRNA,不能编码蛋白质的区段
启动子
1. 编码区:能转录相应的信使RNA,能编码蛋白质的序列。
2. 非编码区 :
原核细胞的基因结构
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
含有能调控遗传信息表达的DNA序列。
不转录,不编码蛋白质;
知识拓展:基因的结构
终止子
与RNA聚合酶结合位点
RNA聚合酶识别并结合的位点,驱动基因转录出mRNA
启动子
终止子
本质:
位置:
作用:
是一段有特殊序列结构的DNA片段;
位于基因上游;
也是一段有特殊序列结构的DNA片段;
位于基因下游;
终止转录
本质:
位置:
作用:
原核细胞的基因结构
知识拓展:基因的结构
启动子
终止子
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
真核细胞的基因结构
编码区
非编码区
非编码区
内含子
外显子
启动子
终止子
外显子:
内含子:
能转录相应的mRNA,进一步能编码蛋白质的DNA序列。
能转录相应的mRNA,但却不能编码蛋白质的DNA序列,然后在翻译前就被剪切掉。
知识拓展:基因的结构
内含子会形成tRNA、rRNA。
非编码区
非编码区
编码区
转录
剪接
外显子
内含子
前体mRNA
成熟mRNA
真核生物基因的表达
知识拓展:基因的结构
真核生物的DNA转录形成的mRNA需要在细胞核加工处理成为成熟的mRNA后才能作为下一步翻译的模板。
CA …… UCCCUAAGGAUAG CCAUCCCAGAUG
--ATGCATGCAT…… CGATCGTAGCCA …… TCCCTAAGGATAG CCATCCCAGATG …… CATGCATCCATGC---
--TACGTACGTA ……GCTAGCATCGGT…… AGGGATTCCTATC GGTAGGGTCTAC …… GTACGTAGGTACG---
某原核细胞基因
非编码区
非编码区
编码区
不编码mRNA
不编码mRNA
(编码mRNA)
启动子
终止子
RNA聚合酶
原核生物基因的表达过程
知识拓展:基因的结构
--ATGCATGCAT…… CGATCGTAGCCA …… TCC