内容正文:
第四章 基因工程
第一节 基因工程赋予生物新的遗传特性
第一课时
稻瘟病是水稻重要病害之一,可引起大幅度减产,严重时减产40%~50%,甚至颗粒无收。严重影响到粮食安全。科学家通过精心设计,用“分子工具”培育出了转基因水稻,它可以有效抵御稻瘟病菌的感染。
DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作,是一项非常精细的工作,更需要专门的“分子工具”。那么,你认为科学家需要用到哪些“分子工具”?这些“分子工具”各具有什么特征呢?
转基因水稻(左)与野生型水稻(右)
1.基因工程的概念:
指有意识地把一个人们所需的基因转入另一个生物体中,使后者获得新的遗传性状或表达所需要产物的技术。
(1)别名:
(2)原理:
(3)操作对象:
(4)操作水平:
(5)结果:
重组DNA技术
基因
分子水平
基因重组
赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品
一、基因工程是在多个生物学分支学科的基础上发展而来
思考1:为什么不同生物的DNA分子能拼接起来?
思考2:为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?
(1)基因是控制生物性状的独立遗传单位。
(2)遗传信息的传递都遵循中心法则。
(3)生物界共用一套遗传密码。
(1)DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。
(2)双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。
一、基因工程是在多个生物学分支学科的基础上发展而来
1944年艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验,不仅证明了遗传物质是DNA,还证明了DNA可以在同种生物个体间转移。
1961年尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。截至19666年,64个密码子均被破译成功。
1970年科学家在细菌中发现了第一个限制性核酸内切酶(简称限制酶)
1972年,伯格首先在体外进行了DNA的改造,成功构建了第一个体外重组DNA分子。
1982年,第一个基因工程药物-重组人胰岛素被批准上市。基因工程药物成为世界各国研究和投资开发的热点。
1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。
1967年,科学家发现,在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力,并可以在细菌细胞间转移。
20世纪70年代初,多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现。这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。
1973年,科学家证明了质粒可以作为基因工程的载体,构建重组DNA,导入受体细胞,使外源基因在原核细胞中成功表达,并实现了物种间的基因交流。至此,基因工程正式问世。
1985年,穆里斯等人发明PCR,为获取目的基因提供了有效手段。
2、基因工程的建立过程
一、基因工程是在多个生物学分支学科的基础上发展而来
(一)限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
简称:限制酶
(1)来源:
主要存在于细菌等微生物中。
(2)作用:
识别双链DNA上特定的一小段核苷酸序列,并催化其中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键水解,使DNA双链在特定的位置断开。
(3)作用部位:
特定部位的磷酸二酯键
A
T
C
G
T
A
G
C
5’
3’
5’
3’
磷酸二酯键
EcoRⅠ
5’…G-A-A-T-T-C…3’
3’…C-T-T-A-A-G…5’
SmaⅠ
5’…C-C-C-G-G-G…3’
3’…G-G-G-C-C-C…5’
二、对DNA进行剪切、连接和复制是实现重组DNA技术的基础
不同限制酶的识别序列一般也各不相同。
5.作用结果(切割产物)
例如,发现于大肠杆菌中的限制酶EcoR Ⅰ的识别序列如图所示,两条链从5’→3’方向的识别序列均为GAATTC。
DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端
(4)识别序列
识别序列通常是4~8个核苷酸对,以6个核苷酸对最为常见
二、对DNA进行剪切、连接和复制是实现重组DNA技术的基础
限制酶所识别的序列的特点是:呈现碱基互补对称,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的,称为回文序列。
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黏性末端
黏性末端
2024/3/23
实例1—EcoRⅠ限制酶:
识别序列为GAATTC,
切割部位为GA之间的磷酸二酯键。
实例2——SmaⅠ限制酶:
识别序列为CCCGGG
切割部位为CG之间的磷酸二酯键。
形成黏性末端
平末端
形成平末端
二、对DNA进行剪切、连接和复制是实现重组DNA技术的基础
(6)限制酶的命名:
用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母,组成了3个字母的略语,以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如,一种限制酶是从大肠杆菌( Escherichia coli)的R型菌株分离来的