2.2.2动物细胞工程-动物细胞融合技术与单克隆抗体课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第二章 细胞工程 第2节 动物细胞工程 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 选必三 P48 授课教师：XXX WxW WxW 1 植物体细胞杂交 植物细胞融合 植物组织培养 有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出及不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？ WxW 1970年，有两位科学家做了一个人-鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。 回忆 WxW 一.动物细胞融合技术 1. 概念 动物细胞融合技术(也称细胞杂交)就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2. 原理： 动物细胞膜的流动性 回顾：植物体细胞杂交的原理是： 植物细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 3. 结果： 形成杂交细胞，即融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 WxW 一.动物细胞融合技术 4. 诱导方法： 物理法： 化学法： 生物法： 振动、离心法、电融合法 聚乙二醇(PEG)融合法 灭活病毒诱导法， 如灭活的仙台病毒 植物体细胞杂交的特有诱导方法： 高Ca2+ - 高pH融合法； 动物细胞融合的特有诱导方法： 灭活病毒诱导法。 【P48相关信息】灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性(不感染细胞) 保留融合活性(诱导细胞融合) WxW 【P49页旁栏思考】19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象? 病人体内的病毒等诱导多个细胞融合形成了多核细胞。 WxW 5. 过程： 一.动物细胞融合技术 动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。 其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性，细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。 灭活病毒诱导细胞融合过程： WxW 6. 意义： 一.动物细胞融合技术 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 。 7. 实例： 正在融合的鸡血细胞 正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞 WxW 8. 应用： 一.动物细胞融合技术 (1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 (2)用于制备______________。 单克隆抗体 9. 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 融合前处理 诱导 方法 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 先除去细胞壁 方法： 先使细胞分散开 方法： 机械法、纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 物理法：电融合法、离心法 化学法：PEG融合法、 高Ca2+ - 高pH融合法 物理法：电融合法、离心法 化学法：PEG融合法 生物法：灭活病毒诱导法 WxW 一.动物细胞融合技术 9. 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 植物体细胞杂交 动物细胞融合 过程 结果 应用 意义 克服了远缘杂交不亲和的障碍/实现远缘杂交，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合。 培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体 杂种植株 杂交细胞 细胞A、B➩去壁➩原生质体A、B ➩融合➩融合的原生质体➩再生出细胞壁➩杂种细胞➩植物组织培养(脱分化、再分化等)➩杂种植株 细胞A、B➩融合➩杂交细胞 (➩有丝分裂➩多个相同杂种细胞) WxW 时间 成果 19世纪30年代 观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞 1858年 观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。 1875年 第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。 1876年 在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。 1962年 日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。 1965年 英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合 1974年 华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 1975年 Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。 20世纪80年代 发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合) 【拓展】动物细胞融合技术的发展历史 WxW 随堂练习 1．关于动物细胞融合的说法，不正确的是(　　) A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的具有两个动