内容正文:
3.1 重组DNA技术的基本工具
中国棉花
1992年,一场史无前例的棉铃虫灾害吞噬着中国的棉田,我国棉花产业遭遇灭顶之灾;
国外公司拒绝出售抗虫棉核心技术,到1999年外国抗虫棉已占领我国95%的棉花市场份额,国内棉花品种市场迅速流失。
棉花棉铃虫幼虫
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2
中国棉花
1998年中棉所成功培育出我国第一个国审抗虫杂交棉新品种--中棉所29,使低龄棉铃虫的死亡率超过90%;
2002年成功培育出我国第一个双价转基因抗虫棉新品种--中棉所41,该品种能够缓解棉铃虫抗药性。
我国成为世界第二个拥有抗虫基因自主知识产权的国家。
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3
基因工程
操作环境及操作对象
原理
操作水平
结果
体外环境;基因
分子水平
基因重组
赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品
基因工程是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。
基因工程
一
二
三
DNA双螺旋结构是谁建立的?
证明DNA是半保留复制的科学家是谁?
第一个基因工程药物是什么?
阅读课本68页-69页,回答下列的问题
让我们一起来看看基因工程的诞生和发展吧~
从社会中来
番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭,当番木瓜被这种病毒感染后,产量会大大下降。科学家通过精心设计,用“分子工具”培育出了转基因番木瓜,它可以抵御番木瓜环斑病毒DNA双螺旋的直径只有2 nm,对如此微小的分子进行操作,是一项非常精细的工作,更需要专门的“分子工具”。那么,科学家究竟用到了哪些“分子工具”?这些 “分子工具”各具有什么特征呢?
环斑病毒的
非转基因木瓜
转基因木瓜
6
培育转基因番木瓜的方法
抗番木瓜环斑病毒基因提取
抗番木瓜环斑病毒基因与载体DNA连接
抗番木瓜环斑病毒基因导入受体细胞
“分子运输车”
“分子手术刀”
“分子缝合针”
培育转基因番木瓜的工具
限制性核酸内切酶--“分子手术刀”
1
主要是原核生物
来源
1、识别双链DNA分子
作用
形成黏性末端或平末端
结果
2、断开磷酸二酯键
磷酸二酯键
切点
?
A
G
T
C
A
T
T
C
G
A
T
A
限制性核酸内切酶--“分子手术刀”
1
G
G
A
T
C
A
T
C
A
T
A
T
大肠杆菌(E.coli)的EcoRⅠ限制酶能特异性识别
_________序列,并切割___和___之间的____________。
切割后产生__________。
GAATTC
G
A
磷酸二酯键
黏性末端
EcoRI 限制酶
限制酶
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
G
G
G
C
C
C
C
C
C
G
G
G
限制性核酸内切酶--“分子手术刀”
1
SmaI 限制酶只能识别 序列,切割 和 之
间的 切开,切割后产生 。
CCCGGG
C
G
磷酸二酯键
平末端
SmaI 限制酶
限制酶
限制性核酸内切酶--“分子手术刀”
1
1.你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗?P71
破坏外源DNA,保护自我
2.为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA? P74二、1
缺乏特定的核苷酸序列
反向对称重复排列
G
G
A
T
C
A
T
C
A
T
A
T
G
G
G
C
C
C
C
C
C
G
G
G
或甲基化保护特定的核苷酸序列
DNA连接酶--“分子缝合针”
把切下来的DNA片段拼接成新的DNA,即将 和 连接起来催化形成 。
脱氧核糖
磷酸
磷酸二酯键
2
12
A
G
T
C
A
T
T
C
G
A
T
A
可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来;
E.coliDNA连接酶
两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来。
T
C
G
A
T
C
注意:DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口,但不能将单个脱氧核苷酸连接到DNA链上!
T4 DNA连接酶
还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来,但效率较低
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
类型
来源
功能
相同点
差别