内容正文:
课时梯级训练(14) 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定
一、选择题
1.(2023·石嘴山高二期末)利用农杆菌转化法将目的基因转入受体细胞后,目的基因插入的位置是( )
A.Ti质粒上
B.受体细胞染色体DNA上
C.TDNA上
D.农杆菌的拟核
B 解析:植物基因工程中,可以用土壤农杆菌作为转移目的基因表达载体的工具,土壤农杆菌细胞内含有Ti质粒,当它侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的TDNA转移至受体细胞,并且将其整合到受体细胞的染色体DNA上。根据农杆菌的这一特点,如果将目的基因插入Ti质粒的TDNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。故选B。
2.我国科学家独创的花粉管通道法,可以使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞,是一种十分简便经济的方法,对此认识正确的是( )
A.不必构建表达载体就可以直接导入
B.此方法可用于转基因动物
C.受体细胞只能是植物的卵细胞
D.有时可以取代农杆菌转化法
D 解析:要让目的基因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表达,不管采用什么导入方法,都需要构建表达载体才能实现,A错误;花粉管通道法只适用于转基因植物的培育,B错误;采用花粉管通道法时,植物受体细胞一般是植物体细胞或受精卵,通常不选用卵细胞,C错误。
3.(2023·济南调研)下列关于目的基因导入受体细胞的描述,正确的是( )
A.可以通过显微注射法直接将目的基因导入动物的受精卵中
B.通过基因工程大量获得胰岛素时,受体细胞选择大肠杆菌比酵母菌更有优势
C.可以用PEG处理大肠杆菌将目的基因导入其细胞内
D.可以使用病毒将目的基因导入受体细胞
D 解析:目的基因导入受体细胞前必须进行基因表达载体的构建,不能直接将目的基因导入动物的受精卵中,A错误;酵母菌细胞中有多种细胞器,作为受体细胞生产胰岛素(分泌蛋白)比大肠杆菌更有优势,B错误;大肠杆菌作为受体细胞时,应使用Ca2+进行处理,C错误;可以利用部分病毒能够将自身DNA整合到宿主细胞染色体上的特点构建基因表达载体,并通过病毒的侵染将目的基因导入相关受体细胞,D正确。
4.目的基因导入受体细胞后,需要检测目的基因是否可以维持稳定和表达其遗传特性。下列关于目的基因的检测和鉴定的叙述,正确的是( )
A.目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是能否转录出mRNA
B.可采用PCR检测目的基因是否转录和翻译
C.可从转基因生物中提取蛋白质来检测目的基因是否翻译成相应蛋白质
D.抗虫、抗病检验用于确定转基因生物是否具备相关性状,属于分子水平的检测
C 解析:目的基因导入受体细胞后,首先要检测转基因生物(染色体)DNA上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键,A错误;PCR可用于检测目的基因是否转录,检测目的基因是否翻译用抗原—抗体杂交技术,B错误;抗虫、抗病检验用于确定转基因生物是否具备相关性状,属于个体生物学水平的鉴定,D错误。
5.在基因工程操作中,科研人员利用识别两种不同序列的限制酶(R1和R2)处理基因表达载体,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果如下图所示。以下相关叙述错误的是( )
A.该载体最可能为环状DNA分子
B.两种限制酶在载体上各有一个酶切位点
C.限制酶R1与R2的酶切位点最短相距约200 bp
D.限制酶切割时会导致作用位点的氢键和肽键断裂
D 解析:当仅用一种限制酶切割载体时,仅产生一种长度约为800 bp的DNA片段,因此该载体最可能为环状DNA分子,A正确;两种限制酶同时切割时则产生两种长度的DNA片段,所以两种限制酶在载体上各有一个酶切位点,B正确;两种限制酶同时切割时产生长度约为600 bp和200 bp的两种DNA片段,所以两种限制酶的酶切位点最短相距约200 bp,C正确;限制酶切割DNA分子,破坏的是作用位点的磷酸二酯键,D错误。
二、非选择题
6.农杆菌转化法是植物基因工程的常用方法,下图为这种方法的示意图,回答下列问题:
(1)一般情况下农杆菌不能侵染的植物是____________,利用农杆菌在自然条件下侵染植物的特点,能将目的基因导入植物细胞。具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在TDNA,它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞的____________________上的特点,因此只要将目的基因插入________________(填部位)上即可。
(2)植物基因工程中,将目的基因导入受体细胞除可采用农杆菌转化法之外,还可采用________________等。
答案:(1)单子叶植物 染色体DNA Ti质粒的TDNA
(2)花粉管通道法
解析:(1)一般情况下,农杆菌不能侵染单子叶植物,但其可侵染双子叶植物和裸子植物。农杆菌细胞内含有Ti质粒,当它