内容正文:
第3章 基因工程
第1节 重组DNA技术的基本工具
栏目索引
自主落实·掌握必备知识
合作探究·提升关键能力
学以致用·发展核心素养
素养训练·学业质量评价
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第3章 基因工程
课时目标 1.运用结构与功能观,分析基因工程中三种基本工具各自的作用。(生命观念)
2.运用归纳与概括的方法,分析基因工程载体需要具备的条件。(科学思维)
3.根据DNA的理化性质,分析DNA的粗提取与鉴定的原理。(科学探
究)
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第3章 基因工程
一、基因工程的诞生和发展
1.基因工程的概念
(1)操作对象:____。
(2)操作水平:______________。
(3)结果:创造出更符合人们需要的新的________和生物产品。
基因
DNA分子水平
生物类型
自主落实·掌握必备知识
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第3章 基因工程
2.基因工程的诞生和发展[连线]
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第3章 基因工程
二、重组DNA技术的基本工具
1.基因工程的工具酶
(1)限制性内切核酸酶(限制酶)——“分子手术刀”
原核生物
特定核苷酸序列
特定部位
磷酸二酯键
黏性末端
来源 主要是从________中分离纯化出来的
种类 数千种
作用 识别双链DNA分子的______________,使每一条链中________的__________断开
结果 产生________或平末端
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第3章 基因工程
(2)DNA连接酶——“分子缝合针”
①作用:将______________“缝合”起来,恢复被______切开的__________。
②种类
双链DNA片段
限制酶
磷酸二酯键
E.coli
大肠杆菌
黏性
T4噬菌体
种类 来源 特点
____________ DNA连接酶 ________ 只能连接____末端
T4 DNA连接酶 __________ 既可以“缝合”黏性末端,
又可以“缝合”平末端
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第3章 基因工程
2.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
(1)种类:____、噬菌体、动植物病毒等。
(2)常用载体质粒:质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,并具有________能力的__________________。
三、DNA的粗提取与鉴定
1.实验原理
(1)提取思路
DNA、RNA、蛋白质和脂质等在______________方面存在差异,可以利用这些差异,选用适当的物理或化学方法对它们进行提取。
质粒
自我复制
环状双链DNA分子
物理和化学性质
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第3章 基因工程
(2)提取原理
①DNA______酒精,但某些蛋白质____酒精,利用这一原理,可以初步分离DNA与蛋白质。
②DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于______________的NaCl溶液。
(3)鉴定原理
不溶于
溶于
2 mol/L
二苯胺
蓝
DNA+______试剂__色
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第3章 基因工程
2.方法步骤
(1)称取约30 g洋葱,切碎,然后放入研钵中,倒入10 mL______,充分研磨。
(2)去除滤液中的杂质
研磨液
研磨液
上清液
离心管
方案一 在漏斗中垫上纱布,将洋葱______过滤到烧杯中,在4 ℃冰箱中放置几分钟后,再取______
方案二 直接将洋葱研磨液倒入塑料______中,在1 500 r/min的转速下离心5 min,再取上清液
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第3章 基因工程
(3)DNA的析出
酒精
丝状物
方案一 在上清液中加入体积相等的、预冷的____溶液(体积分数为95%),静置2~3 min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA;用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起______,并用滤纸吸去上面的水分
方案二 将溶液倒入塑料离心管中,在10 000 r/min的转速下离心5 min,弃上清液,将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干
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第3章 基因工程
(4)DNA的鉴定
取两支20 mL的试管,各加入2 mol/L的________溶液5 mL。将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中,再向两支试管中各加入4 mL的______试剂。混合均匀后,将试管置于____中加热5 min。待试管冷却后,比较两支