第2节 第1课时 微生物的基本培养技术（Word教参）-【优化指导】2023-2024学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 单选版）

第2节　微生物的培养技术及应用 第1课时　微生物的基本培养技术 课时目标 1.运用适应观，阐明培养基的营养构成。(生命观念) 2．采用分析与比较、归纳与概括的方法，说明常用无菌技术的异同。(科学思维) 3．尝试利用给定的实验方案，进行微生物的纯培养。(科学探究) [对应学生用书P7] 一、培养基的配制 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 (3)种类：液体培养基、固体培养基等。 2．培养基的营养构成 (1)一般组成：水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。 (2)特殊需求：满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。 二、无菌技术 1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。 2．主要方法 项目 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理、化学或生物等方法 杀死物体表面或内部的一部分微生物 煮沸消毒 日常用品 巴氏消毒 不耐高温的液体 灭菌 强烈的理化方法 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 湿热灭菌 培养基、容器等 干热灭菌 玻璃器皿、金属用具等 灼烧灭菌 接种工具、试管口等 三、微生物的纯培养 1．相关概念 (1)培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。 (2)纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体。 (3)纯培养：获得纯培养物的过程。 2．微生物的纯培养步骤：配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等。 四、酵母菌的纯培养 1．制备培养基 (1)配制培养基：称取去皮马铃薯200 g，切块→加水1 000 mL，加热煮沸至软烂→纱布过滤→加葡萄糖20 g→加琼脂15～20 g→蒸馏水定容至1 000 mL。 (2)灭菌：培养基放入高压蒸汽灭菌锅灭菌；培养皿放入干热灭菌箱灭菌。 (3)倒平板：待培养基冷却至50 ℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板。具体操作如下： 2．接种和分离酵母菌 (1)平板划线法的原理 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。 (2)平板划线的具体操作 3．培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28 ℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24～48 h。 ◆漫画助学 ◆名师点睛 1．扩大培养获得大量菌种时常用液体培养基。 2．病毒为非细胞生物，只能在活细胞中营寄生生活，不能利用培养基来培养。 3．培养自养型微生物，通常需要提供无机碳源，如CO2、NaHCO3等；而培养异养型微生物，则需要提供有机碳源，如糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等。 4．固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。 5．巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时，减少营养物质损失。 6．用紫外线进行消毒时，照射前适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。 7．一般情况下，在实验操作过程中，对能灭菌的对象进行灭菌处理，如培养皿及用到的各种器具；对无法灭菌的对象则进行消毒处理，如实验操作者的衣着和双手等。 ◆思维启迪 1．如何通过培养基的营养组成判断微生物的同化类型？ 提示：若培养基中含有机碳源，则培养的是异养型微生物；若培养基中不含有机碳源，则培养的是自养型微生物。 2．培养基灭菌后，要冷却到50 ℃左右时开始倒平板，原因是什么？用什么方法来估计培养基的温度？ 提示：琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时温度高于50 ℃会烫手，低于50 ℃时，若操作不及时，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以倒平板了。 3．如果在培养基上观察到了不同形态的菌落，可能是什么原因造成的？ 提示：培养基灭菌不彻底或接种过程中有杂菌污染。 ◆概念检测(对的画“√”，错的画“×”) 1．所有的培养基中都需要加入琼脂。(　　×　　) 2．培养霉菌时一般需将培养基调至碱性。(　　×　　) 3．培养厌氧微生物时，除需要提供无机碳源之外，还需要提供无氧的条件。(　　×　　) 4．灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。(　　√　　) 5．无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)，都可采用湿热灭菌法进行灭菌。(　　×　　) 6．平板划线操作中，划完一个区域后要将接种环灼烧，再划下一个区域。(　　√　　) 7．平板划线法接种时，每一次划线前都要蘸取菌种。(　　×　　) [对应学生用书P9] 任务一 培养基的配制 牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌