内容正文:
第三章 基因工程
能力提升卷
1、 选择题
1.反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列(图中L、R)进行扩增的技术,其过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是( )
A.过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割
B.过程②需要使用DNA连接酶,形成磷酸二酯键
C.过程③PCR体系需要添加DNA聚合酶和解旋酶
D.该技术可检测T-DNA整合到植物染色体DNA的位置
2.用XhoI和SalI两种限制酶分别处理同一DNA分子,酶切位点及酶切产物电泳结果如图。以下叙述不正确的是( )
A.该DNA分子有可能是环状双链结构
B.XhoI和SalI识别的核苷酸序列不同
C.图2中的酶切产物可用于构建重组DNA
D.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物
3.原核细胞具有防止外来DNA入侵的系统,主要由限制酶和甲基化酶组成。通常限制酶只能识别未甲基化的相关序列。而Dpnl酶却可以特异性识别并切断腺嘌呤甲基化后的GATC序列,因此常被用于PCR后切除大肠杆菌来源的模板DNA。下列相关叙述错误的是( )
A.限制酶可识别并切割外源DNA,以防止被入侵
B.甲基化修饰可以避免原核细胞自身DNA被切割
C.PCR时应加入甲基化酶,便于Dpnl酶识别并切割
D.该防御系统的形成是原核细胞长期进化的结果
4.某科研小组从土壤菌株A、B中分离到同源性为93%的Bt1抗虫基因和Bt2抗虫基因的编码序列,并运用交错延伸PCR技术获得了抗虫性能强的重组B基因,转入烟草获得成功,过程如下图所示。下列选项正确的是( )
注:①交错延伸PCR:基因Bt1和Bt2均作为模板,所需引物相同,图中仅示其中一条链的延伸情况。②启动子Pr1a可在烟草叶肉细胞中特异性启动基因的转录。③图中生长素合成酶基因是通过成熟mRNA逆转录获得的DNA片段,可使植物细胞合成生长素。
A.若用EcoRI(5'—G↓AATTC—3')和限制酶XmaI(5'—G↓CCGGG—3')双酶切多个目的基因,能避免两个目的基因连接成环
B.复制原点是RNA聚合酶识别和结合的位点
C.在培养愈伤组织的培养基中添加卡那霉素可以筛选含有Bt重组基因的细胞
D.图中生长素合成酶基因不能促进愈伤组织生根
5.镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病,由正常血红蛋白基因 (HbA) 突变为镰刀形 细胞贫血症基因 (Hbs) 引起, HbA 和 Hbs 的某片段如图甲。对胎儿基因检测的主要原理是: Mst Ⅱ限制酶处理扩增后的 DNA; 加热使酶切片段解旋,用荧光标记的 CTGACTCCT序列与其杂交;凝胶电泳分离。图乙是凝胶电泳后荧光出现的三种可能性下列叙述错误的是( )
A.提取胎儿DNA 样品后,扩增DNA 需要添加特定的引物
B.用 MstⅡI限制酶处理DNA 不充分,可能把正常人误判为携带者
C.荧光标记序列越长,图乙-c 中两个DNA 条带间的距离越大
D.若某胎儿检测结果为图乙-b, 则该胎儿为镰刀形细胞贫血症患者
6.为提高大豆对磷元素的吸收能力,研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低蹄基因OsPTF转移到大豆植株中,下图为重组Ti质粒上T一DNA的序列结构示意图。下列相关叙述错误的是( )
A.以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因
B.RNA聚合酶与启动子1识别并结合后,启动抗除草剂基因的转录
C.可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织
D.用EcoRI、BamHI酶同时切重组Ti质粒后,经电泳分离至少得到两条不同长度的带
7.为探究海鲷催乳素启动子(psbPRL)的关键功能位点,将启动子区域序列进行分段截短,分别构建含荧光素酶基因的重组质粒,检测启动子的启动能力,结果如下图。下列叙述错误的是( )
A.将启动子序列插入荧光素酶基因的上游
B.用限制酶和DNA连接酶构建重组质粒
C.荧光值越高代表启动子的启动能力越强
D.150-700bp之间具有提高启动能力的序列
8.大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后,拟核 DNA 就会缠绕在细胞壁碎片上,静置一段时间,质粒分布在上清液中,利用上述原理可初步获得质粒DNA。用限制酶Ⅰ和Ⅱ处理提取的产物,电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述错误的是( )
A.提取DNA时可加入酒精,使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后,可用二苯胺试剂进行鉴定
C.用限制酶Ⅰ和Ⅱ处理提取产物的电泳结果说明未提取到质粒
D.溶菌酶能溶解大肠杆菌细胞壁,洗涤剂能瓦解其细胞膜,但对DNA没有影响
9.某DNA分子上有2个BamHI的酶切位点,如下图,用BamHI酶切该DNA分子可以生成3种不同长度的DNA片段。现有足够多的该DNA分子