(六)基因工程、生物技术的安全性与伦理问题-【衡水金卷·先享题】2024-2025学年高二生物选择性必修3同步周测卷（人教版单选）

高二同步周测卷/生物学选择性必修3 A,我国已批准上市的转基因食品可放心食用 (六)基因工程、生物技术的安全性与伦理问题 且我国反对生物武器及其技术和设备的扩散 (写试时间4D分钟，满分100分) C,我国支持和发展试管塑儿等辅助生殖技术 一，选择题：本题共12小题，每小题4分，共8分。每小题给出的四个远项中，只有一 D.我国不赞成任何治疗性克降的实验 个透项是最符合覆目要求的。 五.廊草剂的有效成分草甘掉能够专一性抑制E合成南的作用，从而使植物多种代 L,在重组DNA技术中，需要用载体将外源基因法人受体细胞。下列关于线体的叙述 谢途径受影响面导致植物死亡。草甘牌没有选择性，除掉杂草的同时作物也会受混， 中，正确的是 培育抗草甘群作物是解决办法之一。下列关干转人外源EPSP合成南基因使矮伞牛 入.我体是基因工程所雷的三种工具醇之一 抗草甘辟流程的叙述，情误的是 B,对某种限割障而言，截体最好有多个切点，但还要有其他多种取制酶的切点 A.可以通过mRNA在逆转录酵的作用下构建DNA文岸，从中获霰EPSP合成酶 C.日前常用的载体有质粒，蝶菌体和动植物病毒 基因 D基用表达我体上的杭性基因有利干促进日的基西在受体细思中的表达 且用限制所和DNA连接酶处理日的基因和T门质乾，仅沙及瞬酸二陆世的斯裂和 2,下指表示DNA租提取与鉴定”实验的基木藏型，下列相关叙述情误的是 形成 0收材·函发碎锤胞+①代得滤液+①去弹杂质+位进一少复相→山NA墨定 C,基因表达建体组件中的启墙子基RNA聚合酶识别和结合的部位，平动基因转录 A.本实验使用了体职分数为95%的酒精 D,用草甘膜同时喷调转基肉植物和对照组植物可检期转基同植物对除草剂的筑性 B.步程①中可以使用猪的杆细脸作为实碧材料 瓦.CR1SPR/Ca9是一种高效的基因编耕技术，在单链向导RNA(SgRNA)引导下， C。步骤中可以使用沙布对研增液进行过滤，并货取上清液 C陆9基因表达产生的C对蛋白像一把”分子剪刀”".切湖DNA双战以敲除日标基因 D步景⑥向试管中加人二苯胺试剂后静置多mn后即可呈现蓝色 《肥基因)成捕人新的基因，其工作原理如下图所示。下列分析正确的是 3,维哺乳动物乳牌生物反应器研发成功后，磅晓生物反应器的研究迪取得了一定进影 最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其粉花上皮细胞可以合成人的生长激索并分混 早人受体帝透 到尿液中，下列叙述错误的是 N4 表 A将人的生长激常基因导人小风受体细胞，常用的方法是显微注射法 8减合排NA SNA引导制 B.进行基因转移时，通常要将外源基因转人小限的腾跳上皮细胞中 日标A序列 C,通常采用R技术检测外源基因是否插人到鼠的基因组 林国mDW两C令景自进行 D.在研制赣花生物反应器时，应使外源基因在小佩的防晓上发组胞中特异表达 A,Cs9蛋白的萌切对象是目标基因组序列中与RNA互补的DNA单链 4.生物技术的飞速发展给人类带来了巨大的社会和经济效益，同时业不可避免地引发 B若设计的SgRNA基因越短，侧成基因骑制技术的精布皮越高 了人们对新兴生物技术安全性的扣忧。下列叙述错误的是 C.对不可目标DNA连行编辑时，使用Ca9蛋白和相同的SgRNA进行基因编辑 D,其使DNA序列含有与SgRNA互补配对的序列，造成gRNA错误结合而脱视 生物学（人教版！选择性必修3第1页（共8页） 衡水金鞋”先享题·高二同步周测卷六 生物举（人数版）选择性必修3第2置《共5宽】 .蛋白质工程是新围起的一项生物工程，是基因工？的延钟。下图为蛋白履工程的流 示，电袜检测结果如周丙所示。下列相关叙述错误的是 程。下列有关叙述正确的是 蛋白随工程 2 DNA企设 分子初计 复基酸序列 蛋白暖 ,面维果功健 多肤桂 三修帖和 了生有药耀 中6 A.蛋白顾工程不需要对基因迹行晨作 五蛋白质工程是直接对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质 A.操作过程中需要用到的工具有限制南，DNA连接南和载体 C,①过程为转录和想择 B,构建表达载体时应选用kI和Hi目这两种限料酶 D,蛋白质工程是从①开始的 C.P℃R反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升祖和一次降细 从.限制衡德识别双诗DNA分千的特定核营酸序列，并使特定部位的化学时断开。修 )由图丙电林结果可知，1,2,3,4号转基因锦花均培育成功 箭刚能对DNA或RNA的碱基进行修饰，防止DNA或RNA按限制刷破环。某些 11,下阁是道过基因工程获得转基因生物成产品的流程阁。下列说法正确的是 弹菌体能寄生在特定大肠杆菌体内进行紫殖，下列叙述正确的是 amm A,不能拔嘴菌体浸染的大肠杆菌，细面廖上可能没有商体可识别的特异性受韩 的系因 B能被葉菌体侵染的大局杆菌，体内无槟糖体，不能合成酸坏外源DNA的限别脚 KNA EONA C,能寄生于大肠杆菌的噬商体，口NA上一定设有大肠杆菌限制筒的识月位点 D.能寄生于大肠杆菌的感菌体，DNA上不可能存在与大肠杆菌相同的修饰物 9。干扰素是一种具有干拒柄毒复制作用的幅蛋白。可以用于治疗柄非的感染和籍症，国 A,若利用图示流程构建工程菌授量生产胰高素，应光从垂体细电中获取总RNA 体外保存相当闲指。如图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，据用分析下 B,PCR扩增日的基因时，可在特异性引物3'端柔加N和】和Nh:I的切周位点 列叙述错误的是 ,剖备能分忽人路岛素的工释商时，解母菌比大肠仟菌更适合作为受体组围 下技闲高碳琳可活可储干丝素模可 图中m为启诗子，n为终止子，m是解旋酶识群和结合的位点 人工DNA 12.面对日常生活中与转基因技术有美的话圈时，我门需要理性拒表明观点和参与讨 餐齿十机图，在发体盟中衣达新的于玩素品四 论，下列叙述带误的是 入，图中构建新的干扰素榄型的主要依据是新的干扰素的预期功能 A.对转基因产品进行标树管理，让消费者有知情权和选择权 钱图巾新的干搅素基因必须新人到质粒上的启动子和修止子之间才能表达 且转基因食品风段评估时需费考虑目的基圆和标记基因的安全性问题 C.图中夜数干拔素结构的实质是改造干犹素基因的结构 C,只要有正智表明转基因产品有害，就成该禁止轮基因技术的研究 D.图中各过程异没有渗及基因工程技术 D要看到经济，文化和伦理通德程念等的差界使人们对转基因技术有不同的看法 10.光领色索基因在翼节作物生长发育中具有重要作用。为深讨米中光饭色索基因 肝量 雄名 分数 A(含大约256个碱基对)在棉花种质黄源创制中的利用价值，研究人员将光敏色素 号 34 5 A基因转人到棉花中，对棉花受体细脑进行检测，并通过电这技术分析结果。该过 12 程所用质粒与含光敏色素基因的DNA上相关限出两的酵切位点分别加图甲、乙两 生物学[人数微引益降性总修3第3页共8页 衡水金卷+光京赠·高二同步周测进六 生物学（人教版）选择性必修3第4页〈共8页) 二、非选择题：共3小题，共52分。 (4)在CR反应韩系中，除雷加人引物、概板基因.援冲液，Mg等外，还雷加 13.(18分)甜玉米与普通玉米相比，甜玉米中可帝性糖向淀粉的转化较侵，含可溶性 入 等，PR的反应程序，94℃5mn4℃ 显高，计多质抛，富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值，科研人员通 3动，55℃30s,72℃1min,30个酯环，在循环之前的91℃5min处理为衡变性： 过转基因技术培育出了超量表达P蛋白转基树甜玉来。在超量表达P基两载体的 谐环中72℃处理的口的是 构建巾，所用DNA片段和T质粒的酶切位点如图1所示，P蛋白在玉米株系的表 达量如图2所示。同容下列问思： 14,(17分)某动背体内含有研究者愿兴您的日的基因，研究者欲将该基因导人大肠杆 菌的质较中保形，该质较常有氨苄青霉素抗性琴因(Am),LcZ基因及一些刷切 位点，其结构和荷单的操作步骤如下图所示。月答下列问鹰： 位点 作基网 1 (1)强启动于是一段有特殊结构的DNA片段，能被 识划并结 和日的某习 日的某网 合，事动基因的持续转录，为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用限消衡 有 组合，将片段和T质粒切开后构建重组表达载体，TDNA 的清物测 在该实验中的作用是 (1)在第②步中，程远样用 (填相有”或“不同”)的限制倒或切 期能产生相同末端的限制酶切闲质粒和含有目的基因的D、A片段。限制刚的切 《2)将妆杆菌液浸泡湿过的玉米愈伤粗织进行植物组织培养，培养基中需加人 相位点 (填“能”或”不能”位于目的基因的内部，限制陶 《填 进行筛达，箭选出的鱼伤组织 形成丛芽，最终获得多个 “能或不能)鼓环质粒的启动子终止子，标记基因，复科原点等结构。 五米橡1，，。通过对，：，：，四林甜玉米快系的蛋白质表达量进行测 (2)培养基中除了加人大肠杆微所必雷的营养特质外，还需要添加 定（结果如图2），其中株系P蛋白表达量较低的原因可能是 以粳筛选导人口的基因的大肠杆菌 (3)为了确保日的基因与截体的连接发生定向连接重，以粳定向克隆和藏功表达， 《3)为了选一步提高甜玉米中可溶性糖的合量，科研人是提出通过降低淀粉酶合成 可以采用 的方法 有关基因的表达实现生产日标，研究人员研究发观吗体反文寡镜普酸是一种RNA (4)在完成第④步操作后，菌液中大肠杆菌分为未转化，导入空自质较，导人重组西 剪接排制剂，将其生人植特雏胞内会使基因表达受阻，科研人员将吗琳反义寡核轩 粒三种，它们在图中培养基中培养后观察到的结果分别是 酸导人玉米的受特卵中起到明是效果。针对它的具体作用，科研人员提出以下 假说， 假说1，导数RNA前体上内含子1的对成序列不能被剪切： 假说2，号数RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列判时被明切。 为了验正上述假说，分别从受精邪发育后3天的实验粗和对照组胚罪胞中挑取 ,逆转录形成 ,进行PCR后电法. 生物学（人教版！志择性必修3第5页（共8页） 衡水金鞋”先享题·高二同步周测卷六 生物举（人数版）选择性必修3第6置《共8宽】 15,(17分)人域毛骸促性跟徽素是女性怀华后胎盘溢养层雏散分泌的一种糖蛋白，由 《4)为了检章重组质粒是否构建成功，提取大肠杆菌中的质粒为概板，设什相应的引 a徒和B链(CG)结合面成。近年研究显示，kG卵可表达于结肠癌等多种恶性肿 物透行PCR扩增，期最好选择图：中的引物 PCR反应扩 指饵胞，与种的发生，发展及转移有一定关系。研发抗℃疫苗已成为近年来 增的产物进行 案确定可用于导人停母菌的重组质粒 种指生物并疗新的热点，下图1为其制备的基本方案。容下列有关问题 ·P A▣ 4+一 序列 ■ A0X1座时子华序列+ 2 ◆囚回 导入N (5)阶段W需将处理后的脖母菌接种在培养基上培养，该培养基不需要举机 。○粒 的名C破在分离、翼片发时螺.验一 伍A型 (从“氨苄青霜素”“组氨酸”无机盐”一感出中选填)，可在此培养基上生 氨青有即水外件环调忙复图合成费琳因 长的醇母菌即为含有CG明基因表达载体的日的菌抹。将此菌株扩大培养后，离心 住1：甲序列指导合成的信号肽使引导后棱合成的肽链进人内质网轻。 取上清液，用 进行检测。若上清液中能检测到以CG卵蛋白， 生2：A0X1为甲醇氧化酶基州的启动子，只使在以甲醇为雕一酸的培养某中正管表达。 则说明℃3基因得以表达 (1)图中记基因需要与甲序列一起构建形战磁合基因，其口的是 《6)从生产控制的角度分析，选用A(OX1作为(CG3基因启动子的优点是 (2)当日的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时，就可以发生同激 切翻，将目的基因直接铺人。同源切副是一种代替 将日的基 因导人基因表站载体的方法。 (3)阶段目将环化质教导人用 处理的大肠杆两，然后在常有 的烧养基中第选得到含G房基因表达线体的大肠杆菌后 进行扩增， 生物学[人数微引益降性总修3第7页共8页 街水金卷·光享磁·高二同步周离鞋六 生物学（人教版》选择性必修3第8页（共8页）高二周测卷 ·生物学（人教版）选择性必修3· 高二同步周测卷/生物学选择性必修3（六） 9 命题要素一览表 注： 1.能力要求： I.理解能力 Ⅱ.实验探究能力Ⅲ.解决问题能力V.创新能力 2.学科素养： ①生命规念 ②科学思雏③科学探究①社会责任 知识点 能力要求 学科素养 预估难度 题号 题型 分值 (主题内容) Ⅲ ① ② ③ 档次 系数 1 选择题 4 基因工程的操作工具 L 易 0.78 DNA粗提取与鉴定 2 选择题 中 0.60 实验 3 选择题 基因工程的应用 0.65 生物技术的安全性与伦 选择题 0.76 理问题综合 5 选择题 基因工程综合 中 0.55 6 选择题 基因工程综合 中 0.40 7 选择题 蛋白质工程 中 0.65 8 选择题 基因工程综合 难 0.27 9 选择题 基因工程综合 中 0.69 10 选择题 基因工程综合 中 0.55 11 选择题 4 基因工程综合 难 0.24 12 选择题 4 转基因产品的安全性 易 0.72 13 非选择题 18 基因工程综合 中 0.50 14 非选择题 17 基因工程综合 中 0.60 15 非选择题 17 基因工程缘合 中 0.58 香考管案及解析 一、选择题 质粒、噬菌体和动植物病毒，它们的来源不同，在大 1,C【解析】载体是基因工程所需的三种工具之一，载 小，结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的 体不属于酶，A错误：对某种限制酶而言，最好只有一 大小上也有很大差别，C正确：基因表达载体上的抗 个切点，但载体上还要有其他多种限制酶的切点，以 性基因有利于重组DNA分子的筛选，D错误。 便于目的基因与其连接，B错误；目前常用的载体有 2.D【解析】DNA不溶于酒精，而细胞中的某些物质 ·81 ·生物学（人教版）选择性必修3· 参考答案及解析 可以溶解于酒精，本实验使用了体积分数为95%的 也含有与向导RNA(SERNA)互补配对的序列，造成 酒精，目的是析出含杂质较少的DNA,A正确：肝细 向导RNA(SgRNA)错误结合而脱靶，D正确。 胞含有细胞核和众多的细胞器，步骤①中可以使用猪 7.C【解析】蛋白质工程并不是直接对蛋白质进行加 的肝细胞作为实验材料，B正确：步骤③中可以使用 工修饰的，蛋白质工程是通过改造或合成基因，来改 纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液，上清液中含 造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，A,B错误： 有DNA,C正确：步骤⑥中DNA鉴定时向试管中加 基因通过①转录形成mRNA,之后经过②翻译形成 入二苯胺试剂后，应将试管置于沸水中加热5min,待 多肽链，C正确：蛋白质工程是从预期蛋白质功能开 试管冷却后可观察到蓝色，D错误。 始的，即①，D错误。 3.B【解析】将日的基因导入动物细胞最有效的方法 8.A【解析】不能被噬菌体侵染的大肠杆菌，细胞膜上 是显微注射法，所以将人的生长激素基因导入小鼠受 可能没有噬菌体可识别的特异性受体，使得噬菌体不 体细胞，常用的方法是显微注射法，A正确：进行基因 能对其识别并侵染，A正确：大肠杆菌为原核生物，体 转移时，通常要将外源基因转入受精卵或早期胚胎 内有核糖体，B错误：如果噬菌体的DNA上有修饰 中，原因是受精卵（早期胚胎细胞）具有全能性，可使 的识别位点，修饰酶能对DNA的碱基进行修饰，防 外源基因在相应组织细胞表达，而不是将外源基因转 止DNA被限制酶破坏，即使其DNA上有大肠杆菌 人小鼠的膀胱上皮细胞中，B错误：通常采用PCR技 限制酶的识别位点，其DNA也能在大肠杆菌内复制 术检测外源基因是否插入鼠的基因组，C正确：在研 和表达，使得噬菌体能寄生于大肠杆菌，C错误：能寄 制膀胱生物反应器时，应在目的基因前加膀胱中特异 生于大肠杆菌的噬菌体，DNA上可能也存在与大肠 表达的基因启动子，使外源基因在小鼠的膀胱上皮细 杆菌相同的修饰物，防止其被大肠杆菌内的限制酶识 胞中特异表达，D正确。 别并破坏，D错误。 4.D【解析】我国已批准上市的转基因食品是通过一 9,D【解析】蛋白质工程的主要依据是蛋白质的预期 系列的安全性评价，符合相应标准才能上市的，所以 功能，因此图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋 可放心食用，A正确：我国对于生物武器采取的态度 白质的预期功能，A正确：启动子是RNA聚合晦识 是不发展，不生产、不储存生物武器，并反对生物武器 别和结合的位点，从而驱动转录，而终止子提供转录 及其技术和设备的扩散，B正确：我国支持和发展试 终止的信号，故新的干扰素基因必须插入质粒上的启 管婴儿等辅助生殖技术，C正确：中国政府不赞成，不 动子和终止子之间才能表达，B正确：蛋白质工程的 允许、不支持，不接受任何生殖性克隆人实验，但是不 实质是对基因进行操作，因此图中改造干扰素结构的 反对治疗性克隆，D错误。 实质是改造干扰素基因的结构，C正确：题图中从“人 5,B【解析】可以通过mRNA在逆转录酶的作用下构 工合成DNA”到“在受体细胞中表达”的过程运用了 建cDNA文库，从中获取目的基因，A正确：用限制酶 基因工程技术，D错误。 和DNA连接酶处理日的基因和Ti质粒，涉及碱基之 10.D【解析】该操作需借助基因工程才能实现，因此 间的氢键和DNA片段之间的磷酸二酯键的断裂和 操作过程中需要用到的工具有限制酶，DNA连接醇 形成，B错误：启动子是RNA聚合酶识别和结合的部 和载体，A正确：由图可知，构建基因表达载体时，应 位，驱动基因转录，C正确：基因工程的第四步是目的 选用BclI和HindⅢ这两种限制醉，B正确：PCR反 基因的检测与鉴定，可以进行个体生物学水平检测， 应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升 用草甘膦同时喷酒转基因植物和对照组植物可检测 温（第一次使目的基因变性，第二次使目的基因延 转基因植物对除草剂的抗性，D正确。 伸)和一次降温（使目的基因复性），C正确：光敏色 6.D【解析】Cas9蛋白属于内切酶，其前切对象是具 素基因A含大约256个碱基对，由图丙电泳结果可 有特定序列的DNA双链，A错误：据题意分析，无法 知，1,2,3、4号均导入光敏色素基因A成功，但转 确定设计的SgRNA基因长短与该基因编辑技术的 因棉花是否培有成功还需要进行个体生物学水平上 精准度，B错误：由图可知，SgRNA具有识别作用，在 的鉴定，D错误。 对不同目标DNA进行编辑时，应使用Cas9蛋白和 11.C【解析】若利用图示流程构建工程菌批量生产胰 “不同"的SgRNA结合进而实现对不同基因的编辑， 岛素，应先从胰岛B细胞中获取总RNA,A错误： C错误；CRISRP/Cas9基因编辑技术有时存在编辑 PCR扩增目的基因时，可在特异性引物5'端添加 出错而造成脱靶，其最可能的原因是其他DNA序列 NcoI和NheI的切割位点，这样可以保证构建的 ·82· 高二周测卷 ·生物学（人教版）选择性必修3· 限制腾切割位点位于目的基因的两端，B错误：制备 达量基本相同，可能原因是：株系玉米中未导入目 能分泌人胰岛素的工程菌时，酵母菌比大肠杆菌更 的基因或目的基因未表达。 适合作为受体细胞，这是因为酵母菌细胞中含有内 (3)针对吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制 质网和高尔基体，能对合成的胰岛素进行加工，C正 剂，提出假说1和假说2，为验证上述假说，可分别 确：图中m为启动子，n为终止子，m是RNA聚合 从受精后3天的实验组和对照组胚细胞中提取总 酶识别和结合的位点，D错误。 RNA,逆转录形成cDNA。 12.C【解析】对转基因产品进行标识管理，让消费者 (4)PCR技术指的是体外扩增DNA的技术，其需要 有知情权和选择权，属于理性看待转基因技术，A正 的条件有模板DNA,四种脱氧核苷酸，一对引物、 确：在基因表达载体上，除了有目的基因、启动子，终 Tag DNA聚合酶等：PCR的反应程序：94℃5min: 止子等外，还需要标记基因，故转基因食品风险评估 94℃30s,55℃30s,72℃1min,30个循环。在循 时还需考虑标记基因的安全性问题，B正确；若有证 环之前的94℃5min处理为预变性；循环中72℃ 据证明转基因产品不安全，则该产品不能进行应用， 处理的目的让子链延伸，即使Tag DNA聚合酶从引 但可以根据实际情况决定是否进行转基因技术的研 物的3'端起始进行子链的延伸。 究，C错误：由于不同的人在经济，文化和伦理道德 14.(17分，除标注外，每空2分) 观念等方面存在差异，所以不同的人对转基因技术 (1)相同不能不能 会有不同的看法，D正确。 (2)X-gal、氨苄青霉素 二、非选择题 (3)双酶切（用不同的酶切割）含目的基因的DNA 13.(18分，除标注外，每空2分》 片段和载体(3分) (1)RNA聚合得(1分)BmHI和SacI将强 (4)没有菌落蓝色菌落白色菌落 启动子和P基因带人玉米细胞并整合到玉米细胞染 【解析】(1)限制酶可以切割质粒和含有目的基因的 色体DNA上 DNA片段，选择限制酶的时侯需要注意：选择用相 (2)潮霉素(1分)再分化1株系玉米中可能没 同的限制酶或切制能产生相同末端的限制酶切割质 有导入目的基因或目的基因未表达 粒和含有目的基因的DNA片段，并且注意限制酶 (3)总RNA cDNA 的切割位点不能位于目的基因的内部，以防破环目 (4)Tag DNA聚合醇、4种脱氧核苷酸(dNTP) 的基因，限制酶也不能破坏质粒的启动子、终止子、 Tag DNA聚合酶从引物的3'端起始进行子链合成 标记基因、复制原点等结构。 【解析】(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片 (2)筛选导入了目的基因的受体大肠杆菌，质粒 段，能被RNA聚合晦识别并结合，驱动基因的持续 LacZ基因中插入了外源基因，带有目的基因质粒的 转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，需要将 大肠杆菌便不能表达}半乳糖苷酶，培养基中的 P基因导入到玉米细胞中，因此需要首先构建基因 Xgal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌 表达载体，则P基因和T质粒需要相同的限制酶酶 落，因此选择培养基中还应加入Xg,氨苄青霉素， 切位点，结合图示可知，BamH I后面有强启动子不 用于筛选导入了重组质粒的受体大肠杆茵。 能丢弃，限制降EcoR I和NotI会破坏目的基因， (3)为了确保日的基因与载体定向连接，防止发生自 因此选择限制酶BamH I和SacI的组合。T-DNA 身环化和插入方向错误，导致无法定向克隆和成功 是可转移的DNA,T-DNA可将强启动子和P基因 表达，可以通过用两种不同的酶切割出具有不同末 带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上· 端的载体和含有目的基因的DNA片段，而后通过 随着玉米染色体DNA的复制而复制，从而使目的 DNA连接酶的作用实现日的基因和载体的正向 基因在受体细胞中稳定存在。 连接。 (2)将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组 (4)未转化的大肠杆菌不含有Amp,不能在含有氨 织培养，重组质粒中有潮霉素抗性基因和卡那霉素 苄青霉素的培养基中形成菌落，空白质粒含有完整 抗性基因，但植物细胞能表现出对潮霉素的抗性，因 的LacZ基因，其编码产生的3半乳糖苷酶可以分 此，培养基中需加人潮霉素进行筛选，将缔选出的愈 解Xg1产生蓝色物质，导致该大肠杆菌菌落变为 伤组织经过再分化（细胞分化）形成丛芽，从而获得 蓝色：甘的基因插入到LacZ基因中产生的重组质 多个转基因玉米株系。：株与野生型的P蛋白表 粒，没有完整的LacZ基因，不能发生颜色变化，表 ·83· ·生物学（人教版）选择性必修3· 参考答案及解析 现为正常的白色大肠杆菌菌落。 菌具有氨苄青霉素抗性，因此应在含有氨苄青霉素 15.(17分，除标注外，每空2分) 的培养基中筛选得到含hCG3基因表达载体的大肠 (1)有利于hCG进入内质树加T 杆菌后进行扩增。 (2)限制降(1分) (4)融合基因包含了目的基因和A,B序列，则进行 (3)Ca+(1分)氨苄青霉素 设计引物的时候应该包括A,B序列和目的基因的 (4)P和P,琼脂糖凝胶电泳（或“测序”） 部分序列，所以图中的引物1和引物6是合适的引 (5)氨苄青霉素、组氮酸抗原一抗体杂交法（或 物。PCR反应扩增的产物可通过琼脂糖凝胶电泳 “hCGB的抗体") 或测序的方法进行鉴定。 (6)可以通过控制培养液中甲醇的有无来控制hCG邱 (5)由于环状质粒中含有组氨酸合成酶基因和氨苄 基因表达(3分) 青霉素抗性基因，且筛选重组质粒时大肠杆菌是在 【解析】(1)甲序列指导合成的信号肽能引导后续合 含有氨苄青霉素的培养基上培养的，因此为筛选导 成的肽链进入内质网腔，因此hCGB基因需要与甲 入重组质粒的酵母菌，培养基中不需要再加人组氨 序列一起构建形成融合基因，其目的是有利于hCG3 酸和氨苄青霉素，但需要加入无机盐和琼脂，形成固 进入内质网中加工，并分泌到细胞外。 体培养基，以筛选目的菌体。hCG3是一种分泌蛋 (2)传统重组质粒构建过程需要使用限制酶和DNA 白，可被分泌到细胞外，将培养物离心后分出细胞和 连接酶，而该过程是运用同源切割的方式在hCG3 培养液两部分，细胞经破碎处理后，再次离心取上清 基因两端加上一组同源序列A、B,然后将hCG3基 液，可获得较多的hCGB,用抗hCGB单克隆抗体分 因与线性质粒载体混合后，在重组酶和DNA连接 别进行检测，即抗原一抗体杂交法。若培养液及上 酵的作用下形成环化质粒，该过程没有使用限制酶。 清液中均能检测到hCG?蛋白，则说明hCG3基因在 所以同源切割是一种代替限制酶将目的基因导入基 酵母菌细胞中得到表达，并能分泌到细胞外。 因表达载体的方法。 (6)AOX1为甲醇氧化酶基因的启动子，只能在以甲 (3)将重组质粒导人大肠杆菌时，应先用C+处理 醇为唯一碳源的培养基中正常表达，因此选用 大肠杆茵，使其处于感受态。由于线性质粒上含有 A(OX1作为hCG弟基因启动子，可以通过控制培养液 氨苄青霉素抗性基因，因此导入环化质粒的大肠杆 中甲醇的有无来控制hCGB基因的表达。 84·