内容正文:
聚焦
学习目标:
1.培养基的配制
2.无菌技术
3.微生物的纯培养
第2 节 微生物的培养技术及应用
第1课时 微生物的基本培养技术
新冠病毒
噬菌体
人类免疫缺陷病毒
蓝细菌
大肠杆菌
乳酸菌
醋酸菌
衣藻
酵母菌
毛霉
草履虫
变形虫
微生物的概念:微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。
3/12/2024
有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.
3/12/2024
芽孢——休眠体,不是繁殖体
孢子——生殖细胞
1. 定义:单个或少数同种菌体在固体培养基上大量繁殖,形成肉眼可见的子细胞群体。
2. 特征:形状、大小、颜色、光泽度、透明度等。
3. 功能:菌落是鉴定菌种的重要依据。
知识补充:菌落
沙门氏菌
毛霉
青霉菌
酵母菌
_____________,______________________ _是研究和应用微生物的前提,也是发酵工程的重要基础。
防止杂菌污染
获得纯净的微生物培养物
微生物的基本培养技术
确保其它微生物无法混入
——无菌技术
提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
——培养基
将需要的微生物分离出来
——纯培养
难以用肉眼观察到的微生物该如何培养呢?
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出其生长繁殖的营养基质叫做培养基。
1)培养、分离、鉴定、保存微生物。
2)积累其代谢物。
2.用途
1)分类依据一物理性质
3.类型
液体培养基
不含凝固剂,呈液体状态
微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落。
固体培养基
+琼脂
凝固剂
一.培养基的配制
1.定义
2)分类依据一功能
混合样品
选择培养基上部分菌种才能生长
普通培养基上所有菌种都能生长
选择培养基
鉴别培养基
目的菌
鉴别培养基上目的菌周围出现透明圈
非目的菌
鉴别培养基上非目的菌周围无明显现象
2)分类依据:功能
选择培养基
培养基中加氨苄青霉素
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
没有氨苄青霉素抗性的细菌
具有抗氨苄青霉素能力的细菌
没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰
培养基的类型及用途
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂(易溶于沸水,在98℃以上熔化,在44℃以下凝固)
扩大培养、工业生产
观察微生物的运动、
分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
加入某种化学物质,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
天然培养基
合成培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
选择培养基
鉴别培养基
具体处理 原理 目的
选择培养基 加入青霉素 青霉素能抑制细菌生长,
对真菌无作用
不加氮源 固氮微生物能利用空气中的氮气
不加有机碳源 自养型微生物能利用无机碳源
高温 分离耐高温的微生物
鉴别培养基 加入酚红培养基 尿素被分解产生氨,培养基呈碱性,酚红指示剂变红。
加入刚果红 刚果红与纤维素能形成红色复合物,当纤维素被分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。
分离酵母菌、霉菌等真菌
分离固氮菌
分离自养微生物
鉴别分解尿素的细菌
鉴别纤维素
分解菌
在培养基中加入某种化学物质/改变培养基中的营养成分/培养条件
4.成分
1)基本成分
碳源
氮源
水
无机盐
无机碳源:
CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源:
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等
无机氮源:
NH4+、NO3- 、NH3、硝酸盐等
有机氮源:
牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
——自养微生物
——异养微生物
注:含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。
K2HPO4、MgSO4、NaCl、CaCl2、Ca(NO3)2、FeSO4等
——调节酸碱平衡、 维持渗透压
氮源是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的
除上述营养物质外,培养基是否还需要其他物质呢?
—固氮
微生物
——水是微生物生长和代谢必不可少的营养物质。
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000mL 水
表1-1 1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
注:牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机