2.2动物细胞融合和单克隆抗体课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

二、植物体细胞杂交技术 课前提问 胰蛋 白酶 处理 取动物组织 分散成单个细胞 细胞悬液 加培养液 转入培养液中进行培养 离心法收集细胞并制成细胞悬液 原代培养 分裂受阻 转入新的培养液中进行培养 传代培养 分瓶培养 第2章　细胞工程 本节聚焦: 什么是动物细胞融合技术？ 单克隆抗体是如何制备的？ 在临床上有哪些应用？ 第2节 动物细胞工程 (二)动物细胞融合和单克隆抗体 （2课时） 从社会中来 运用植物体细胞杂交技术，可培育新的作物类型 那么，能不能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢？ 1.动物细胞融合的原理是什么？ 2.所形成的杂种细胞有什么特点？ 3.诱导动物细胞融合的方法有哪些？ 与植物细胞融合技术相比，特有的是哪种方法，其原理是怎样的？ 任务：根据概念，分析以下问题： 一、动物细胞融合技术 原理：细胞膜的流动性 1.动物细胞融合的概念： 具有两个或多个细胞的遗传信息 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 灭活病毒诱导法 就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 动物细胞融合完成的标志： 相关信息 灭活病毒融合原理 融合后形成单核细胞 细胞核的融合 一、动物细胞融合技术 2.意义：突破___________的局限，使__________成为可能。 成为研究_________、_________、肿瘤和培育新品种的重要手段; 并用于制备___________。 细胞遗传 细胞免疫 单克隆抗体 有性杂交 远缘杂交 3.应用： （主要） 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理方法 诱导细胞融合的方法 细胞融合成功的标志 主要用途 意义 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 用 去除细胞壁 用 使细胞分散成单个细胞 电融合法、离心法； 聚乙二醇（PEG）融合法、 高Ca2+-高pH融合法 聚乙二醇PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 再生出细胞壁 细胞核的融合 获得完整的杂种植株 主要用于制备单克隆抗体 打破生殖隔离，实现远缘杂交 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较 归纳总结 植物细胞的全能性 果胶酶和纤维素酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 这个场景大家再熟悉不过了 出外做核酸太麻烦，在家如何确定自己是否“阳”了？ 单克隆抗体 1.传统生产抗体的方法是怎样的? 有何缺限？ 单克隆抗体：由单一B淋巴细胞克隆（增殖）的细胞群产生的特异性抗体。 如何得到能产生抗体且增殖能力强的细胞？ (P49第一段第1、2句) 思考与讨论 单克隆抗体 2.分析概念中“单”和“克隆”的含义。总结单克隆抗体的概念？ 单克隆抗体制备的思路 融合细胞 动物细胞培养 单克隆抗体 动物细胞融合 骨髓瘤细胞 （能大量增殖） 一种B淋巴细胞 （只分泌一种特异性抗体） 1975年，米尔斯坦和柯勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖 杂交瘤细胞 具体流程应该怎样操作呢？ 1.如何获得能产生新冠病毒抗体的B淋巴细胞？ 2.如何诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合？ 3.初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？如何筛选出杂交瘤细胞？筛选出来的杂交瘤细胞有什么特点？ 4.小鼠在生活中还会受到其他抗原的刺激，杂交瘤细胞是否都能分泌新冠病毒抗体？ 5.如何筛选出能分泌新冠病毒抗体的杂交瘤细胞？ 6.经筛选后得到的杂交瘤细胞的数量有限，怎样获得大量的单克隆抗体？ 7.单克隆抗体制备过程中用到的技术手段有哪些？原理是什么？ 二、单克隆抗体制备的过程 任务：根据课本流程图，回答以下问题： 二、单克隆抗体制备的过程 任务：根据课本流程图，回答以下问题： 问题1：如何获得能产生新冠病毒抗体的B淋巴细胞？ 给实验小鼠注射灭活的新冠病毒（特定的抗原） 问题2：如何诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合？ 培养骨髓瘤细胞 聚乙二醇（PEG）融合法 电融合法 灭活病毒诱导法 问题3：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？ 不都是 13 问题3：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？ 应该如何筛选出杂交瘤细胞？ 筛选出的杂交瘤细胞有什么特点？ 未融合、B与B、瘤与瘤、杂交瘤细胞 用选择培养基进行筛选，只有融合的杂交瘤细胞才能生