3.2.2 动物工程（二）课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

3.2.2 动物细胞工程（二）——动物细胞融合技术与单克隆抗体 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 1 过渡：怎样克服不同动物之间的生殖隔离，让不同种动物的体细胞进行杂交？ 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 3.2.2.4 动物细胞融合技术 动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术 动物细胞融合的原理与植物原生质体融合的原理相同。常用的诱导融合方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏其抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞融合。 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 3.2.2.4 动物细胞融合技术 动物细胞融合能突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，这一技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育新品种的重要手段，特别是为制备单克隆抗体开辟了新途径 细胞水平上缺失的性状与丢失的染色体有关 核移植 肿瘤细胞和树突状细胞融合，可以更有效地激发免疫反应 可能的新品种 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 传统方法（注入抗原→血清分离）制备的抗体一般为多克隆抗体，产量低、纯度低，特异性差 3.2.2.5 单克隆抗体及其应用 注射 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 注射 3.2.2.5 单克隆抗体及其应用 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群，就可以获取纯度高、特异性强的单克隆抗体。由于增殖能力有限，体外培养B淋巴细胞难以大量制备单抗 有限稀释 克隆化培养 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 3.2.2.5 单克隆抗体及其应用 米尔斯坦和科勒用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，融合形成的杂交瘤细胞可以在体外大量增殖，大量产生单抗 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 注射到腹腔 注射抗原 培养骨髓瘤细胞 多种B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 诱导融合 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 体外培养 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 多轮次的克隆化培养和抗体检测 体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖 从培养液或小鼠腹水中获得大量的单克隆抗体 杂交瘤细胞 单克隆抗体 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 注射到腹腔 注射抗原 培养骨髓瘤细胞 多种B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 诱导融合 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 体外培养 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 多轮次的克隆化培养和抗体检测 体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖 从培养液或小鼠腹水中获得大量的单克隆抗体 杂交瘤细胞 单克隆抗体 B淋巴细胞依靠细胞表面受体与抗原（固定在介质上）结合。取出介质，再将与抗原结合的B林巴细胞从介质上冲洗下来。 （由于B细胞表面受体还在，所以此处得到的并不是浆细胞） 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 注射到腹腔 注射抗原 培养骨髓瘤细胞 多种B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 诱导融合 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 体外培养 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 多轮次的克隆化培养和抗体检测 体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖 从培养液或小鼠腹水中获得大量的单克隆抗体 杂交瘤细胞 单克隆抗体 同一种抗原可能与多种抗体与结合。因此，可能存在多种B淋巴细胞都可以依靠其细胞表面受体与同一种抗原结合。 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 注射到腹腔 注射抗原 培养骨髓瘤细胞 多种B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 诱导融合 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 体外培养 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 多轮次的克隆化培养和抗体检测 体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖 从培养液或小鼠腹水中获得大量的单克隆抗体 杂交瘤细胞 单克隆抗体 HAT培养基上只有杂交瘤细胞可以生长增殖。机理可以自行查询。 课件创意@小狗啃骨头（刘永生） 课件引用图片仅限于教学用途 注射到腹腔 注射抗原 培养骨髓瘤细胞 多种B淋巴细