内容正文:
第二章 细胞工程
知识点(一) 植物组织培养技术
[教材知识梳理]
(一)植物组织培养技术
1.概念分析
原理
细胞全能性
对象
离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等
条件
无菌条件,在适宜的培养基上培养
结果
使其发育成部分或完整植株
2.主要步骤
(二)天竺葵的组织培养
1.实验原理
(1)植物体的每个体细胞都携带了来自受精卵的完整的基因组。当其处于离体状态时,经过适当处理后,它们在适宜的培养基上,经过脱分化、再分化,可发育成完整的植株。
(2)组织培养得到的试管苗是非常幼嫩的植株。其表面蜡质和角质层等保护组织不发达,气孔数目少,有叶绿体但光合作用能力差。这样的试管苗一般要经过炼苗,以逐渐适应自然环境下的生长条件。
2.实验步骤
[微提醒]
诱导愈伤组织、诱导生芽和诱导生根的培养基不同,它们之间最大的差别是生长素和细胞分裂素的相对浓度的不同。
[核心要点点拨]
(一)从不同角度归纳细胞全能性
1.全能性大小
(1)体细胞全能性:分化程度低的>分化程度高的,细胞分裂能力强的>细胞分裂能力弱的。
(2)不同细胞的全能性:受精卵>生殖细胞>体细胞。
(3)不同生物的细胞全能性:植物细胞>动物细胞。
2.全能性与细胞分化的关系:随着细胞分化程度的不断提高,细胞的全能性逐渐降低。
3.植物体细胞表现细胞全能性的条件
材料
离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等
培养基
种类齐全、比例合适的营养物质及一定比例的植物激素
外界条件
①无菌操作;②光照:诱导愈伤组织时一般不需要光照,再分化时需要光照
(二)图示法理解植物组织培养的过程
植物组织培养过程中应注意的问题
(1)接种时注意外植体的方向,天竺葵叶片不能放反。
(2)天竺葵的组织培养中,愈伤组织的形成一般不需要光照,而在后续的培养过程中,需要给予适当时间和强度的光照。
(3)试管苗一般在高湿、弱光、恒温等条件下培养生长,出瓶后一定要注意保温、保湿。
(4)试管苗的光合作用能力弱,在移栽前应给予较强光照闭瓶炼苗,以促进幼苗向自养苗转化。
(三)植物组织培养技术的几个易错点
1.外植体的选择与制备
选择
外植体脱分化的难易程度因植物种类、器官来源及生理状况的不同而不同。一般来说,植物的花药和幼嫩的组织脱分化相对比较容易,而植物的茎、叶和成熟的组织脱分化较难
制备
制备外植体首先要消毒,其次要选取有形成层的部分,因为形成层细胞易脱分化
2.无菌操作
植物组织培养成功的关键是避免微生物的污染,所有实验用具要严格灭菌,接种过程要进行严格的无菌操作。
3.光照的控制
对于植物组织培养来说,光照条件非常重要。在愈伤组织的诱导阶段往往要避光培养,有利于细胞脱分化产生愈伤组织(如果是在光照条件下,容易分化产生维管等组织,不利于产生大量的愈伤组织)。当愈伤组织分化出芽和叶时,一定要有光照,有利于叶片内叶绿素的合成。
4.植物激素的使用
(1)由愈伤组织进行细胞分化时,一般要先诱导其生芽,然后诱导其生根,可通过控制培养基中生长素和细胞分裂素用量的比例来实现。
(2)生长素和细胞分裂素用量的比例影响植物细胞的发育方向。
生长素用量/细胞分裂素用量
结果
比值高
有利于根的分化,抑制芽的形成
比值低
有利于芽的分化,抑制根的形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
[典例] (2023·泰州质检)红豆杉属于珍稀植物,从红豆杉树皮中提取的紫杉醇具有独特的抗癌作用,但产量低、成本高。科学家利用植物组织培养的方法解决了这一问题,培养红豆杉的流程如图。
(1)图中红豆杉组织被称为________,①过程的目的是让已经分化的细胞失去其特有的____________________而转变成具有分生能力的细胞,该过程叫______。②③过程的名称是________________,实质是__________________________________________。
(2)愈伤组织的特点是________________________________________。从脱分化到再分化需要更换新的培养基,原因是____________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)植物组织培养的过程一般可以归结为( )
A.植物体
B.愈伤组织胚状结构植物体
C.植物体
D.胚状结构愈伤组织植物体
(4)①过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值________。(填“较大”“适中”或“较小”)
[解析] (1)图中红豆杉组织被称为外植体,①过程表示脱分化,目的是让已经分化的细胞