2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节 动物细胞工程 二、动物细胞融合与单克隆抗体的制备 能否让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢? 大量获得特定的B淋巴细胞，并想办法使其具备增殖甚至无线增殖的能力。 2 融合细胞 细胞 融合 37℃ 40min 正在融合的细胞 红色荧光染料标记膜蛋白 绿色荧光染料标记膜蛋白 人细胞 小鼠细胞 灭活的病毒诱导细胞融合的 1.概念 使_____或_____动物细胞结合形成_____细胞的技术 2.结果 形成的 具有_________________________ 3.原理 ____________________ 两个 多个 一个 杂交细胞 原来两个或多个细胞的遗传信息 细胞膜具有一定的流动性 一 动物细胞融合技术概述 4.诱导融合的常用方法 PEG融合法 电融合法 灭活病毒诱导法 用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 （1）.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？ （2）.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？ 5.融合实质及完成的标志： 细胞核的融合 6.意义 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 7.应用 ①细胞融合技术已经成为研究 、 、 和 等的重要手段 ②利用动物细胞融合技术发展起来的 ，为_____ 开辟了新途径 细胞遗传 细胞免疫 肿瘤 培育生物新品种 杂交瘤技术 制造单克隆抗体 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理方法 诱导细胞融合的方法 细胞膜具有一定的流动性；植物细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性 用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁 机械的方法 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使组织分散成单个细胞 物理：电融合法、离心法； 化学：PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法 物理：电融合法 化学：PEG融合法 灭活病毒诱导法 二 动物细胞融合和植物体细胞杂交比较 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合成功的标志 主要用途 意义 再生出细胞壁 细胞核的融合 获得完整的杂种植株 主要用于制造单克隆抗体 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 二 动物细胞融合和植物体细胞杂交比较 （1）与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒 （　 　） （2）灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构 （　　 ） （3）二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞 （　 　） 判断常考语句，澄清易混易错 二、单克隆抗体的制备 1.机体通过什么免疫过程分泌抗体？ 2.抗体由什么细胞产生？ 3.抗体的化学本质是什么？ 4.与抗原作用的特点？ 5.抗体主要分布在哪里？ 主要分布在血清中。其次在组织液及外分泌液中也含有。 抗体是机体受抗原刺激后B淋巴细胞增殖分化形成的浆细胞产生 具有免疫功能的球蛋白 能与该抗原发生特异性结合 回顾旧知 抗体 体液免疫 三、单克隆抗体的制备 抗体:机体产生的专门应对抗原的蛋白质 每种浆细胞只能产生一种抗体 1.传统抗体的获得 向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。 产量低、纯度低、特异性差 (2)缺点： 二 (1)方法: 可产抗体，但不能无限增殖 动物体内 抗原 刺激 浆细胞 抗体 筛选单一B细胞 增殖分化 抗原不纯 抗体不纯 三、单克隆抗体的制备 大量制备单一抗体的思路和需解决的问题 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 单一B淋巴细胞 细胞群 选择 克隆 产生 大量纯度高特异性强的抗体 不可能无限增殖 哪种细胞可以无限增殖？ 三、单克隆抗体的制备 肿瘤细胞 产生抗体的B淋巴细胞 大量获得特定的B淋巴细胞，并想办法使其具备增殖甚至无线增殖的能力。 14 3.单克隆抗体制备思路 一种B淋巴细胞（只产生一种特定抗体） 能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞 动物细胞融合 杂交瘤细胞 动物细胞培养 大量的特定抗体 米尔斯坦 科勒 发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖 三、单克隆抗体的制备 1.B淋巴细胞的特点（优点和局限性）*？ 2.癌细胞的特点（优点和局限性）*？ 3.杂交瘤细胞的特点？ 能产生单