内容正文:
第二章 细胞工程
第二节 动物细胞工程——动物细胞培养
从社会中来
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。
怎样才能获得大量的自体健康皮肤?
能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、
扩增;
目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤;
动物细胞工程常用技术
动物细胞培养(基础)
动物细胞融合
动物细胞核移植
1.概念
从动物体中 相关的____ ,将它_____________,然后在_____________ 下,让这些细胞_____和_____的技术;
2.原理:__________________
3.地位:__________________
4.结果:获得细胞或细胞产物
取出
组织
分散成单个细胞
适宜的培养条件
生长
增殖
细胞增殖(有丝分裂)
动物细胞工程的基础
一、动物细胞培养
思考:结合动物细胞培养的概念,思考其基本原理是什么?
1.机体给其体内的细胞提供了哪些适宜的条件使其能够维持正常的生命活动?
2.动物细胞培养实际上是模拟体内的生理条件来进行的,你认为体外培养动物细胞需要满足哪些条件呢?
动物细胞培养的条件
营养条件
其他条件
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
二、动物细胞培养的条件
1.营养
(1)培养基的构成:
将细胞所需的________(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按其_____和_______严格配制而成的培养基,称为___________
使用合成培养基时,通常需加入____ 等一些天然成分
为什么?_______________________________________
(2)培养基的物理性质
培养动物细胞一般使用 ,也称为______
营养物质
种类
所需量
合成培养基
血清
血清中含有多种未知的促细胞生长因子及
其他活性物质,可以补充合成培养基中缺乏的物质
液体培养基
培养液
二、动物细胞培养的条件
合成培养基+血清等天然成分
2.无菌、无毒的环境
①对 和 进行_____处理;
②在________下进行操作;
③还需要 _
培养液
所有培养用具
灭菌
无菌环境
定期更换培养液
目的:清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
在细胞培养液中添加一定量的抗生素抑制细菌的生长
二、动物细胞培养的条件
如何防止培养过程中的微生物污染?
3.温度、pH和渗透压
(1)适宜的温度
哺乳动物细胞培养的温度多以___________ 为宜;
(2)适宜的pH
多数动物细胞生存的适宜pH为________
(3)渗透压也是细胞培养的重要环境参数
维持适宜渗透压的目的______________________
36.5±0.5℃
7.2-7.4
维持细胞正常的形态和功能
二、动物细胞培养的条件
4.气体环境
(1)组成:动物细胞培养所需气体主要有___和____
(2)气体的作用
①O2:_____________________
②CO2:_________________________
(3)培养容器
通常采用_______或____________
(4)培养仪器
含有 和 的混合气体的__________
O2
CO2
O2是细胞代谢所必需的
CO2的主要作用维持培养液的pH
培养皿
松盖培养瓶
95%空气
5%CO2
CO2培养箱
二、动物细胞培养的条件
(1)培养前,为什么要将组织分散成单个细胞?
(2)怎样将组织分散成单个细胞?
(3)细胞培养一段时间,分裂会受阻,这是什么现象?
怎样解决这一问题?
(4)尝试写出动物细胞培养的基本流程。
阅读课本P44-45页,并思考以下问题:
二、动物细胞培养的过程
取动物组织
制成细胞悬液
进行
传代培养
转入培养液进行原代培养
分瓶
取动物组织
制成细胞悬液
进行传代培养
转入培养液进行原代培养
分瓶
二、动物细胞培养的过程
原因:
(2)制成细胞悬液:
用___________,或用______酶、_______酶 等处理的方法,将组织分散成________ ,然后,用______将细胞制成细胞悬液