内容正文:
第1章 发酵工程
第3节 发酵工程及应用
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微
生
物
的
选
择
培
养和计数
微生物的选择培养
选择培养基
间接计数法 — 稀释涂布平板法
直接计数 —计数板计数法
微生物的数量测定
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
温故知新
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从社会中来
问题:在工业上,青霉素究竟是怎样生产的呢?
发酵工程。即利用微生物的特定的功能,通过现代工程技术,规模化生产对人类有用的产品。
青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。早期科学家只能从青霉菌中提取少量,价格贵如金。随着高产菌种的选育、发酵技术的发展等,青霉素步入了产业化生产的道路。如今,一瓶规格160万单位青霉素注射剂的价格只要1元左右。
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一、发酵工程的基本环节
1. 发酵工程:是指利用微生物的特定功能,通过现代工程技术,规模化生产对人类有用的产品。
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
2. 基本环节
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优良的菌种不仅具有健壮,不易退化,其发酵产品的产量高、质量稳定等优点,它往往还会赋予发酵产品独特的风味。
某镇特产一种美酒 ,以下是对该镇环境的描述:四面环山,地势低洼,气候炎热,具有独特的微生物种群,因为与外界的空气对流循环较缓慢,所以微生物种群较稳定。
(1)选育菌种
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工业发酵罐体积
几十 ~ 几百m3
几 ~ 几十m3
接入的菌种总体积
(2)扩大培养
①目的:获得更多的菌种。
②原因:工业发酵罐的体积一般较大,因此,需要接入的菌种总体积大(数目多)。
③扩大培养的培养基:一般为液体培养基。
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思考:怎样对菌种进行扩大培养?
将培养到生长速度最快时期的菌体分开,再进行培养。
思考:扩大培养所用的培养基,从性质上分类,是什么类型的培养基?
液体培养基。可以使微生物与营养物质充分接触,提高营养物质的利用率,有利于微生物的繁殖。
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①在菌种确定之后,(结合菌种代谢特点)选择原料制备培养基;
②在生产实践中,培养基的配方要经过反复试验才能确定(即不断优化培养基)。
(3)配制培养基
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①灭菌原因:发酵工程种所用的菌种大多是单一菌种,一旦有杂菌污染,可能导致产量大大降低。
②灭菌目的:避免因杂菌污染而影响产品的品质和产量。
*培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
(4)灭菌
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(5)接种:
将扩大培养后的菌种投放到发酵罐中。
无菌
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②严格控制发酵条件的原因:环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且影响微生物代谢物的形成。
(6)发酵罐内发酵——发酵工程的中心环节
例如:谷氨酸的发酵生产:在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N -乙酰谷氨酰胺。
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计算机控制系统
监测
控制
温度、pH、溶解氧、灌压、通气量、搅拌、泡沫和营养等
微生物数量、产物浓度
检测
及时添加必需的营养组分
使发酵过程处于最佳状态
微生物的生长繁殖和代谢物的形成
影响
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培养物或营养物质的加入口
观察孔
取样管
电动机
排气管
pH计
冷却水排出口
冷却夹层
发酵液
搅拌叶轮
生物传感器装置
空气入口
温度传感器和控制装置
冷却水进入口
阀门
放料管
抽取样本进行检测
调节罐温
(放气)调节罐压
使微生物与发酵液混合均匀,加快O2的溶解以及散热
控制溶解氧
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下列关于发酵工程的操作流程的叙述,错误的是
A.发酵所需的菌种需要进行筛选或育种获得
B.菌种在接种之前要进行扩大培养
C.发酵所用的培养基要进行灭菌,发酵设备不需要严格灭菌
D.若产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施获得
【答案】C
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【解析】发酵工程所需菌种必须是性状优良的菌种,可以从自然界中筛选,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得,才能获得高品质的产品,A正确;
发酵工程所用的发酵罐较大,为提高发酵效率,发酵之前需要对菌种进行扩大培养,B正确;
发酵工程是在无菌条件下进行操作的,所以所用的培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌,否则很可能会造成培养基的污染,导致产品质量下降,C错误;
要根据所获得的发酵产品的类型分离、提纯产物,若发酵产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
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菌体本身
代谢产物
根据其性质采用蒸馏、萃取、离子交换等方法进行分离、提纯
采用过滤、沉淀等方式进行分离、提纯
(7)产品的分离、提纯
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(8)获得产品
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讨论1:微生物菌种资源丰富,选择发酵工程用的菌种时需要考虑哪些因素?
①在低成本的培养基上能迅速生长繁殖;
②生产所需代谢物的产量高;
③发酵条件容易控制;
④菌种不易变异、退化等。
讨论2:怎样对发酵条件进行调控以满足微生物的生长需要?
要对温度、pH、溶解氧等发酵条件进行严格控制,使其最适合微生物的生长繁殖,同时及时添加必要的