1.2微生物的基本培养技术及应用（第2课时 )课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第1章 发酵工程 第2节 微生物的基本培养技术及应用第2课时 微生物的选择培养和计数 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。 稀释涂布平板法 呈现的杂菌群 从社会中来 1. 科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。 1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 美国黄石公园 那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 一. 选择培养基 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 2. 筛选原则 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 有利于目的菌生长的条件有哪些？ 营养、温度和pH等 一. 选择培养基 5 概念: 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止 其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 类型 条件 分离得到的菌种 改变培养条件 70～80℃的高温 添加某种化学物质 加入青霉素 高浓度食盐 特殊碳、氮源 石油是唯一碳源 营养缺陷 不加碳源 不加氮源 水生栖热菌 酵母菌、霉菌等真菌 金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 自养型微生物 固氮菌 一. 选择培养基 3. 选择培养基 类型: 培养基中加青霉素 具有青霉素抗性的菌落 培养基应有菌落 没有青霉素抗性的细菌被淘汰 怎样选择出抗青霉素能力的细菌? 一. 选择培养基 01 尿素的立体结构 【思考·讨论】 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。 尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。 脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以为细菌生长的氮源。 CO(NH2)2 脲酶 + H2O + CO2 2NH3 一. 选择培养基 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 【思考·讨论】 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。 问 在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。 1.将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 问 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基一 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4 ·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是______________________；该类培养基的主要用途为_____________________________。 2.从用途上来讲， 属于选择培养基，目的是为了获得 。 3.两种培养基共有的培养基成分有： 。 培养基一的主要碳源为 ， 主要氮源为 ； 培养基二的碳源为 ，氮源为 。 固体 添加了凝固剂琼脂 分离、鉴定、计数、保存 培养基二 能分解尿素的微生物 碳源、氮源、无机盐、水 牛肉膏 蛋白胨 葡萄糖 尿素 现学现用 02 1g土壤中有多少能分解尿素的细菌？ 分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物 计数：测定分解尿素的细菌的数量 概念：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。 主要过程: A.梯度稀释菌液 B.涂布平板 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 稀释涂布平板法 二. 微生物的选择培养 02 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g 微量 移液器 ①铲取土样，将样品装入纸袋中 注意：取土样用的小铁铲和盛土样的的纸袋在使用前都要灭菌。 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 ②将10g土样加入盛有90m