内容正文:
普通棉花
转基因抗虫棉
基因工程
Genetic engineering
指按照人们的愿望,通过 等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的 和生物制品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA 上进行设计和施工的,因此又叫作 。
转基因
新的生物类型
分子水平
重组DNA技术
1.概念:
基因重组
②操作水平:
⑤操作结果:
①操作原理:
DNA分子水平
获得新的生物类型和生物产品
③操作环境:
生物体外
④操作对象:
基因
⑥优点:
克服远缘杂交不亲和障碍、定向改造生物性状。
S型菌
荚膜
控制荚膜形成的X基因
加热
杀死
被破坏的S型菌
X基因吸附在R型菌表面
X基因进入R型菌
重组
少数R型菌转化成S型菌
知识拓展
基因重组
R型细菌转化为S型细菌的本质:
3
重组DNA技术的基本工具
基因工程
The basic tools of recombinant DNA technology
聚焦
重组DNA技术所需的三种基本工具是什么?它们的作用分别是什么?
01
基因工程载体需要具备什么条件?
02
计时3min
自主复习(教材70-73)
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease ——"Molecular Scalpel"
第一部分
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease—— "Molecular Scalpel"
切割DNA分子的工具是 ,又称限制酶。
1.来源:
2.种类:
主要来自原核生物
数千种
限制酶不是一种酶,而是一类酶
3.作用特点:
专一性
能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
限制性内切核酸酶
DNA是脱氧核苷酸连接而成的长链
核苷酸连接而成的长链
3,5磷酸二酯键
2.2 DNA的结构
8
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease—— "Molecular Scalpel"
4.识别序列:
EcoR Ⅰ
5’…G-A-A-T-T-C…3’
3’…C-T-T-A-A-G…5’
Sma Ⅰ
5’…C-C-C-G-G-G…3’
3’…G-G-G-C-C-C…5’
BamH Ⅰ
5’…G-G-A-T-C-C…3’
3’…C-C-T-A-G-G…5’
Taq Ⅰ
5’……T-C-G-A……3’
3’……A-G-C-T……5’
大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。例如,EcoRⅠ、SmaⅠ限制酶的识别序列均为6个核苷酸,也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease—— "Molecular Scalpel"
4.识别序列:
EcoR Ⅰ
5’…G-A-A-T-T-C…3’
3’…C-T-T-A-A-G…5’
Sma Ⅰ
5’…C-C-C-G-G-G…3’
3’…G-G-G-C-C-C…5’
BamH Ⅰ
5’…G-G-A-T-C-C…3’
3’…C-C-T-A-G-G…5’
Taq Ⅰ
5’……T-C-G-A……3’
3’……A-G-C-T……5’
限制酶所识别的序列的特点是:呈现碱基互补对称,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的,称为回文序列。
在该序列片段,一条链5’—3’的碱基顺序与其互补链5’—3’的顺序完全一致。
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease—— "Molecular Scalpel"
5.限制酶切割产生的DNA片段末端:
黏性末端或平末端
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease—— "Molecular Scalpel"
实例1:EcoR Ⅰ限制酶的切割
只能识别GAATTC序列,并特定使G和A之间磷酸二酯键断开。
A
A
G
T
T
C
C
T
T
A
A
G
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,形成突出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
C
T
T
A
A
G
G
A
A
T
T
C
限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
Restriction Endonuclease—— "Molecular Scalpel"