第2节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得(课件PPT)-【新课程学案】新教材2023-2024学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程(浙科版2019)

第二节　纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 1.概述微生物的分离和纯化的方法。 2.概述微生物数量的测定方法。 3.举例说明通过调整培养基的配方，可以有目的地培养某种微生物。 类型 操作方法 连续 平行划线 从培养基上的一点出发，向_____连续划平行线至覆盖整个培养基表面 扇形划线 从培养基的一点出发，向多方向多次划线。每划一条线，要将接种环在_____________上灭菌，然后再次从_____起点变换方向划线 多次连续 平行划线 划线可分_____次进行，将培养皿旋转一定角度后，不需再次蘸取菌种，只需在上一次划线的_____区域直接开始划线即可 [主干知识梳理] 一、微生物的分离和纯化 1．平板划线法 左右 酒精灯的火焰 同一 3～4 末端 2.稀释涂布平板法 (1)步骤：菌液的__________ →各取不同稀释度的菌液0.1 mL加在固体培养基表面→用________将菌液均匀涂布→培养。 (2)目标微生物的选择：根据_____的形状、大小、颜色、边缘或表面光滑与否等特征选取目标微生物。 梯度稀释 涂布器 菌落 二、测定微生物的数量的方法 1．稀释涂布平板法 (1)减小随机误差：一是在保证能__________的前提下减小稀释度；二是将相同稀释度下的多组数值取_______后再进行计算。 (2)计算方法：每毫升菌液中微生物细胞的数量＝某一稀释倍数下至少___个培养皿的平均菌落数÷菌液稀释液体积×稀释倍数。 2．显微镜计数法 (1)血细胞计数板 ①一个血细胞计数板含有____个计数区，每个计数区由____个大方格组成，以1 mm×1 mm×0.1 mm大方格为例，其液体体积为_________。 ②计数区正中间的大方格为______计数区，四角的四个大方格是______计数区。 准确计数 平均值 3 2 9 0.1 mm3 红细胞 白细胞 (2)酵母细胞计数 三、有目的地培养某种微生物 1．依据 (1)不同自然环境中生活着的微生物______类型不尽相同。 (2)许多微生物的代谢方式并不唯一。 2．方法 (1)调整培养基中营养物质的______及比例。 (2)有针对性地为目标微生物提供所需的_________。 3．选择培养基 (1)概念：在培养基中添加(或减去)某种______成分，使得只有某些特定的微生物能够生长， ____________均不能生长的培养基。 (2)举例：添加青霉素——筛选对_______有抗性的细菌；不添加氮源——筛选______微生物。 代谢 浓度 生长条件 化学 其他微生物 青霉素 固氮 4．能分解尿素的微生物的分离与计数 (1)实验原理 ①在以尿素为唯一_____的选择培养基上生存的微生物能以尿素为_____ 。 ②细菌合成的_____能将尿素分解成NH3，致使pH升高，使酚红指示剂_____ 。 (2)培养基的对照：制备100 mL ______________和100 mL尿素固体培养基，分别培养土壤中的微生物，对菌落观察并计数。 氮源 氮源 脲酶 变红 LB固体培养基 (3)实验步骤 [预习效果自评] 1．判断下列说法的正误 (1)分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 ( ) (2)对酵母菌计数时，用滴管吸取静置的培养液滴满血细胞计数板的方格区。 ( ) 提示：吸取培养液之前需要将培养液振荡以使酵母菌分布均匀，用滴管在盖玻片边缘滴加，让菌液渗满计数区。 (3)平板划线法简单并且可以用来计数，稀释涂布平板法使单菌落更易分开，但操作复杂些。 ( ) 提示：平板划线法只能用来分离细菌，不能用来计数。 √ × × (4)在培养基中加入酚红指示剂就可以筛选分解尿素的微生物。 ( ) 提示：能否实现筛选，与培养基中是否添加或控制特定物质有关，酚红为指示剂，只是用于鉴别分解尿素的微生物利用尿素的能力。 (5)采用多次连续平行划线法分离细菌时，每次划线都需要从最初的起点开始。 ( ) 提示：多次连续平行划线时，将培养皿旋转一定角度后，不需再次蘸取菌种，只需在上一次划线的末端区域直接开始划线即可。 × × 2．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述不正确的是 (　 ) A．都需要用固体培养基 B．都通过操作进行了稀释 C．都要对接种针进行灼烧灭菌 D．都会在培养基表面形成单个的菌落 解析：这两种接种方法都需要采用固体培养基，A正确；这两种接种方法都通过操作进行了稀释，最终得到单个细胞繁殖而成的肉眼可见的菌落，B、D正确；平板划线法和稀释涂布平板法都不是用接种针，平板划线法使用的是接种环，稀释涂布平板法使用的是涂布