内容正文:
二 微生物的选择培养和计数1.实验室中目的菌的筛选的原理?2.何为选择培养基?
3.稀释涂布平板法统计细胞数量的原理是什么?怎么计算每毫升原液中有多少细胞?
4.稀释涂布平板法统计的菌落往往比活菌的实际数目要多/少?为何?5.显微镜直接计数呢?
6.将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
7.在分离土壤中分解尿素的细菌的实验中,为什么还要配制牛肉膏蛋白胨培养基?
8.每一稀释倍数的菌液都至少要涂布多少个平板,为什么要这样做?
9.分解尿素的细菌用什么来鉴定?看到的结果是什么样的?记完读课本31-38
第1节 植物细胞工程 一 植物细胞工程的基本技术
1.什么叫细胞工程?2.什么叫细胞全能性?3.生物体内的细胞为什么没有表现出全能性?
4.什么叫植物组织培养?植物组织培养的原理?5.复述离体细胞培养成植株的过程
6.什么叫外植体?7.什么叫脱分化?8.什么叫再分化?9.什么叫愈伤组织?
10.植物细胞表现出全能性的条件?11.植物组织培养的操作过程?
12.在植物组织培养过程中,光照、植物激素有什么要求?13.怎么获得原生质体?
14.诱导原生质体整合的物理方法和化学方法分别有哪些?P37细胞融合完成的标志?
15.什么叫植物体细胞杂交?复述植物体细胞杂交的整个过程。
16.植物体细胞杂交的原理有哪些?17.植物体细胞杂交有什么意义?
第二章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
一 植物细胞工程的基本技术
1.植物组织培养技术
2.植物体细胞杂交技术
二 植物细胞工程的应用
细胞工程
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
动物细胞工程
植物细胞工程
原理
操作水平
目的
一、植物组织培养
1.细胞的全能性
原因?
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。
细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能,即细胞具有全能性。
体现细胞全能性的标志?
细胞→完整个体或其他各种细胞
在生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现全能性的原因?
基因在特定时间、空间条件下选择性表达
全能性大小比较:
分化程度越低,全能性越高
如何才能让细胞表现出全能性?
一、植物组织培养
2.菊花的组织培养——过程
根、芽
植物体
脱分化
再分化
培养条件:
①离体 无菌
②营养物质
③植物激素
④适宜环境(温度、PH、光等)
遮光
一定的光照
排列不规则,高度液泡化,呈不定型状态的薄壁细胞
愈伤组织
离体的植物器官、组织或细胞(外植体)
愈伤组织重新分化为芽、根等器官
失去特有结构和功能转变成未分化的细胞
MS培养基(固体培养基)
蔗糖:碳源,提供能量,调节渗透压
细胞分裂素 生长素
一、植物组织培养
2.菊花的组织培养——操作步骤
消毒
取材
接种
培养
移栽
1.如何对外植体消毒?
2.外植体切成多长的小段?插入培养基多少部分?
3.菊花组培过程使用了几种培养基?
4.如何将试管苗逐步移栽到土壤种?
先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日
用流水清洗掉根部的培养基后,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中,待其长壮后再移栽入土。
70%酒精
30S
无菌水
2-3次
次氯酸钠溶液
30min
2-3次
无菌水洗
流水冲分冲洗
(2)为什么说从繁殖方式上看,植物组织培养的繁殖方式是无性繁殖?
提示 植物组织培养是在细胞有丝分裂和细胞分化的基础上实现的,此过程并没有生殖细胞的产生,所以是无性繁殖。
(1)选用菊花的外植体时,一般选用形成层细胞或组织块,其原因是什么?
提示 形成层细胞由于分裂旺盛,全能性高,容易诱导形成愈伤组织,其他部分如叶、花全能性低,不易培养成完整植株。
(3)在植物组织培养的过程中,为什么要求无菌操作?
提示 培养物一旦受到微生物的污染,这些微生物会和外植体争夺培养基中的营养物质,并且产生大量对外植体有害的物质,导致外植体死亡。
二、植物体细胞杂交技术
去壁
①
去壁
①
融
合 ②
再生
新壁
③
脱分化
④
再分化
⑤
移栽
植物细胞融合
植物组织培养
植物体细胞杂交
酶解法
方法:物理方法(电融合法、离心法)
化学方法(聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法)
原理?
意义?
可遗传变异类型:染色体数目变异
细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种等
①融合完成的标志
②体细胞杂交完成的标志
——再生新的细胞壁
——培育出杂种植株
2.将图中的甲和乙两