2.2.2动物细胞融合单克隆抗体 学案导学

选择性必修3新授课学案 2.2　动物细胞融合技术与单克隆抗体 预学案---教材研读 （自主学习） 一、动物细胞融合技术 1．概念：使 动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2．诱导原理和结果 (1)诱导原理： 。 (2)诱导结果：形成 细胞。 3．诱导方法： 法、电融合法和 法等。 4．意义：突破了 的局限，使 成为可能。 5．动物细胞融合技术的应用 (1)成为研究 、 、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 (2)用于制备 。 二、单克隆抗体及其应用 1．制备原理 (1)B淋巴细胞特点： 一种B淋巴细胞分泌一种 抗体。 (2)骨髓瘤细胞特点： 能在体外大量 。 (3)杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能 又能产生大量 。 2．制备过程（如图） 3．单克隆抗体的优点 能准确地识别 ，与特定抗原发生特异性结合，并且可以 。 4．单克隆抗体的应用 (1)作为 ，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。 (2)用于 和 。 判断对错： 1．动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。 ( ) 2．与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素是聚乙二醇。 ( ) 3．用特定的抗原对小鼠进行免疫后，从鼠脾脏中只能得到一种B淋巴细胞。 （ ） 4．单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。 ( ) 5．单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。 ( ) 导学案---课堂探究（疑难点拨） 一、动物细胞融合 1．融合的原理与过程 (1)原理：细胞膜的 。 (2)过程：包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性，细胞融合的实质是 。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为 。如下图(以灭活的病毒诱导为例)： 2．融合的结果 形成单核杂交细胞，具有原来两个或多个细胞的 ，可表现出两个或多个亲本的特点。 3．动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 先除去细胞壁 先使细胞分散开 使用的酶 纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 诱导手段 物理法：电融合法、离心法 化学法：PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法 除物理法和化学法外，也可用灭活的病毒诱导 结果 杂种植株 杂交细胞 应用 培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体 意义 克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合 【合作探究一】 1.什么是灭活？灭活病毒诱导融合的原理是什么？ 2.动物细胞融合与植物原生质体融合的原理相同吗？ 二、单克隆抗体 1．血清抗体与单克隆抗体的比较 名称 产生 特点 血清抗体 由 细胞分泌 一般从血清中分离，产量低、纯度低、特异性差 单克隆抗体 由 细胞分泌 特异性强、灵敏度高，能大量制备 2.制备过程 项目 第一次筛选 第二次筛选 筛选原因 诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有 的细胞 从小鼠体内提取的B淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细胞也有很多种 筛选方法 用特定的 培养基筛选：未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有 细胞才能生长 用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始 培养和 检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 筛选目的 得到 细胞 得到能 的杂交瘤细胞 3．制备单克隆抗体过程中的两次筛选