内容正文:
选择性必修1新授课学案 备课人: 王晓东 审核人 :孟令瑜
1.2.2 微生物的选择培养和计数
【学习目标】
1.阐明微生物选择培养的原理。
2.进行土壤分解尿素的细菌的分离和计数。
教材知识梳理
一、选择培养基
1.实验室中微生物筛选的基本原理:人为提供有利于 ,同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2.选择培养基的概念:在微生物学中,将 特定种类的微生物生长,同时 或 其他种类微生物生长的培养基,叫选择培养基。
3.尿素分解菌分解尿素的原理: 。
二、微生物的选择培养
1.稀释涂布平板法的操作步骤:
①
②
③
④
⑤
⑥
2.微生物的培养条件:待涂布的菌液被 后 ,将平板 ,放入 的恒温培养箱中培养1-2天。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的 。
三、微生物的数量测定
1.稀释涂布平板法计数的原理:稀释涂布平板法除可以用于 外,也常用来统计样品中 的数目,当样品的稀释足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于 。
2.稀释涂布平板计数法统计的平板菌落数范围:
3.稀释涂布平板法的统计方法:在同一稀释度下,应至少对 个平板进行重复计数,然后求出平均值
4.稀释涂布平板计数的特点及原因分析:统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ,这是因为两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是 。因此。统计结果一般用 而不是用 来表示。
5.除上述的活菌计数外,利用 进行直接计数,也是一种常用的、 的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的 或 ,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中的微生物数量,统计的结果一般是 和 的总和。
四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.提出问题:如何分离土壤中分解尿素的细菌?每克土壤样品中含有多少分解尿素的细菌?
2.选择培养基的组成
组分
含量
提供的主要营养
KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10.0 g
尿素
1.0 g
琼脂
15.0 g
H2O
定容至1 000 mL
水
3.实验设计
(1)土壤取样:先铲去表层土,取距地表 cm的土壤层,将样品装入纸袋中。
(2)样品的稀释:一般选用 、 、 倍稀释的稀释液进行平板培养。
(3)微生物的培养与观察:细菌一般在 ℃的温度下培养1~2 d,每隔 统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
1.由于使用了选择培养基,因此本实验不需要设置对照组。( )
2.在用涂布器涂布平板时,为了操作方便可完全打开培养皿盖。( )
3.在同一稀释度下,至少要涂布3个平板。( )
4.当菌落数目稳定时,选取菌落数为30~300的平板进行计数。( )
5.统计菌落数目时,统计的菌落数就是活菌的实际数目。( )
6.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离。( )
7.只要培养基中有尿素即可筛选