内容正文:
第三章第一节 第3课时 目的基因的获取、DNA的
粗提取和鉴定、基因表达载体的构建
必备知识基础练
1.在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是( )
A.逆转录合成cDNA
B.用化学合成法合成
C.利用PCR技术扩增
D.从基因文库中提取
2.下列有关目的基因获取的理解,不正确的是( )
A.目的基因可以从自然界中分离,也可以人工合成
B.cDNA文库的构建需要用到逆转录酶
C.基因文库就是基因组文库
D.cDNA文库只含有某种生物的一部分基因
3.下列有关基因表达载体的叙述,不正确的是( )
A.具有复制原点,使目的基因能在受体细胞内扩增
B.具有启动子,作为核糖体识别、结合的部位
C.具有标记基因,有利于重组DNA的鉴定和选择
D.具有目的基因,以获得特定的基因表达产物
4.为了在大肠杆菌细胞中成功表达人胰岛素基因,首先需要提取细胞的mRNA,经逆转录等过程来获取目的基因。下列相关叙述错误的是( )
A.用于逆转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取
B.逆转录过程需要四种游离的核糖核苷酸作为原料
C.经逆转录得到的目的基因不含启动子和内含子
D.逆转录获取目的基因时,遵循碱基互补配对原则
5.图中pUC18是一种常用质粒,其中ori为复制原点,Ap为青霉素抗性基因,lacZ基因能合成某种酶,该酶能将无色染料X-gal变成蓝色。已知目的基因插入的位置如图所示。为了快速筛选出获得目的基因的大肠杆菌,平板培养基内除了要有大肠杆菌生长所必需的营养物质和琼脂,还必须加入其他物质。下列叙述正确的是( )
A.只需要加入青霉素
B.lacZ基因是目的基因
C.含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌不能将X-gal变成蓝色
D.ori可以启动目的基因的转录
6.[2022江苏扬州邗江中学高二期中改编]用鸡血进行DNA的粗提取与鉴定。下列有关叙述不正确的是( )
A.将鸡血静置后取上清液进行实验
B.DNA在2 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度最大
C.可用冰乙醇进行DNA的纯化
D.在沸水浴条件下,DNA与二苯胺试剂反应呈蓝色
7.[2023江苏盐城伍佑中学高二调研]下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的各步骤操作的目的的表述,错误的是( )
A.沉淀的血细胞中加水是为了使血细胞破裂从而提取DNA
B.加入物质的量浓度为2 mol·L-1的NaCl溶液是为了溶解DNA
C.向溶解有DNA的NaCl溶液中加蒸馏水是为了洗涤DNA,除去杂质
D.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色
8.在DNA的粗提取实验中,将核内DNA溶解于2 mol·L-1的NaCl溶液中后,缓缓加入蒸馏水直到絮状物不再增加,此时若继续加蒸馏水,看到的现象是( )
A.絮状物量不变
B.絮状物量增加
C.絮状物量减少
D.絮状物量先增加后减少
9.下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序。请分析并回答下列问题:
(1)步骤一中向鸡血细胞液中加入 并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二中过滤后,收集含有DNA的 。
(3)步骤三、四的操作原理是DNA在 中溶解度不同而去除杂质。步骤四的主要操作是滴加蒸馏水并搅拌,当观察到溶液中 时,操作停止,过滤去除溶液中的杂质。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,步骤七的具体操作是将步骤六获得的滤液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取 ,然后加入等体积的 ,至烧杯中会出现白色絮状物,这就是粗提取的DNA。
关键能力提升练
10.[2023江苏宿迁泗洪中学高三月考]下图为基因表达载体的模式图。下列叙述错误的是( )
A.构建基因的表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶
B.终止子位于基因的下游,使翻译在所需要的地方停止下来
C.构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在,并遗传给下一代
D.抗生素抗性基因作为标记基因,可检测受体细胞中是否导入了目的基因
11.[多选]下图是基因文库的构建和获取目的基因的示意图。下列叙述不正确的是( )
A.通过该途径能获得该生物的全部基因
B.①过程通常只用一种DNA酶切割全部DNA
C.②过程需要DNA连接酶的作用
D.④过程可用相应抗体,利用核酸分子杂交技术获取目的基因
12.某研究组对DNA粗提取的步骤进行了创新:利用液氮快速粉碎植物样品,采用碱裂解(0.5 mol·L-1 NaOH使细胞破碎)的方式提取DNA,提取的DNA利用TE缓冲液中和,得到DNA粗提溶液。下列说法错误的是( )
A.可采用洋葱或鸡血细胞为材料提取DNA
B.利用液氮处理样品的作用是使植物细胞彼此分离
C.碱溶液可能可以破