内容正文:
动物细胞融合技术与单克隆抗体
1.概念:使______或______动物细胞结合形成_________的技术。
2.原理:_________________。
3.诱导融合的方法
PEG融合法
________法
_______________法
两个
多个
一个细胞
细胞膜的流动性
电融合
灭活病毒诱导
一.动物细胞融合技术
预习检查
小组长检查,课代表收集问题
4.意义:细胞融合技术突破了_________的局限,使__________成为可能。
5.应用
(1)成为研究细胞_______、细胞______、肿瘤和培育___________等的重要手段。
(2)用于制造___________。
遗传
有性杂交
远缘杂交
免疫
生物新品种
单克隆抗体
(1)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒( )
(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构( )
×
与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒。
√
4
1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射某种_____,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需______。
(2)缺陷:________、纯度低、__________。
抗原
抗体
产量低
特异性差
二.单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体的制备
(1)大量制备单一抗体的思路
(2)存在的问题:B淋巴细胞_________________。
不可能无限增殖
(3)解决方案
大量增殖
特定
(4)制备过程
B
淋巴细
胞
杂交
细胞
杂交
瘤
能分泌
所需抗
体
3.单克隆抗体的优点
(1)能准确地识别_______的细微差异。
(2)可以与特定抗原发生________结合。
(3)可以______制备。
4.单克隆抗体的应用
(1)用作__________,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。
(2)运载药物,如ADC(抗体—药物偶联物)。
(3)直接用于治疗疾病。
抗原
特异性
大量
诊断试剂
(1)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,得到的都是杂交瘤细胞( )
×
B淋巴细胞与骨髓瘤细胞如两两融合,得到的融合细胞有3种,即B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞,需要筛选才能得到杂交瘤细胞。
10
(2)单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的相同( )
(3)ADC的抗体具有靶向运输作用、药物具有治疗作用( )
×
单克隆抗体制备过程中第一次筛选是为了筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选是为了获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
√
11
任务一:动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较
1.19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中,观察到多核细胞。如何解释这一现象?
提示 病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
2.比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术
(1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么?
提示 动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
(2)两者在方法上有什么异同?
提示 都可用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合;但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。
(3)两者在最终结果上有什么不同?
提示 动物细胞融合最终得到的是杂交细胞,而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。
任务二:单克隆抗体的制备过程和单克隆抗体的应用
1.根据单克隆抗体的制备过程,回答以下问题:
(1)给小鼠注射特定抗原的目的是什么?
提示 目的是能从该小鼠的脾中得到可以产生特定抗体的B淋巴细胞。
(2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后,培养基中共出现几种细胞?理论上融合的细胞有几种?体系中出现多种类型细胞的原因是什么?(若细胞融合,只考虑两两融合)
提示 若只考虑细胞两两融合,培养基中共出现5种细胞。理论上融合的细胞有3种。细胞融合是随机的,且融合率达不到100%。
(3)单克隆抗体制备过程中,第一次筛选的目的是什么?方法是什么?
提示 第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞。方法是用特定的选择培养基进行筛选。
(4)资料:①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基蝶呤阻断。
②免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但它不能分裂增殖,其本身也不能在体外长期存活。
③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但它能不断分裂增殖。如果它的D途径被阻断的话,它会因不能合成DNA而死亡。
请根据上述资料提出筛选出杂交瘤细胞的方法。
提示 培养基中加入氨基蝶呤。
(5)单克隆抗体制备过程中,第二次筛选的目的是什么?方法是什么?其原理是什么?
提示 第二次筛选的目的是筛选出能分泌所需抗