2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节 动物细胞工程 （动物细胞融合技术与单克隆抗体） 第二章 细胞工程 众志成城 抗疫情 1．为什么要号召新冠感染痊愈者捐献自己的血浆？这样的血浆对新冠感染患者有什么作用呢？ 血浆中有新冠病毒的抗体, 可以用于治疗新冠感染患者。 但一个捐献者的200-300毫升的血浆，如果合格，一般也只能治疗2-3个患者。 众志成城 抗疫情 传统抗体制备方法及缺陷 抗原 传统抗血清 （所有抗体混合） 免疫 1 1 2 3 4 缺陷：产量低、纯度低，特异性差。 如何解决上述缺陷呢？ 资料： ①小鼠在外界环境中会接触多种抗原，体内产生的特异 性抗体种类多达百万种以上 ②每个B淋巴细胞（浆细胞）只分泌一种特异性的抗体 从社会中来 从社会中来 1.视频中了解到针对新冠肺炎真正的特效药是什么？ 2.这种特效药有着怎样的特点呢？ 针对新冠病毒的单克隆抗体。 这种单克隆抗体可以和新冠病毒特异性结合，准确定位、药效强、持续时间久，并且可以大量储备生产。 要制备单克隆抗体，就需要找到一种能分泌抗体且增殖能力强的细胞。 浆细胞 癌细胞 一个极富创造力的方案： 动物细胞融合 杂交瘤细胞 动物细胞培养 单克隆抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒发明了单克隆抗体的制备技术，于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。 活动一：建构模型 活动一：以小组为单位，讨论单克隆抗体的制备过程，选出两位小组代表上台演示。 活动一：以小组为单位，讨论单克隆抗体的制备过程，选出两位小组代表上台演示 要求： 1、小组为单位，在学案上绘制单克隆抗体制备流程图（可用文字＋图像 形式呈现） 2、小组代表上台展示，用准确语言简述单克隆抗体制备过程和特点 3、倾听本组和其他小组发言，可及时补充或质疑 4、限时5分钟 活动一：建构模型 注射抗原 多种B淋巴细胞 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 细胞融合 多种杂交细胞 思考：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞有几 种？是否都是杂交瘤细胞？ 思考：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞有几 种？是否都是杂交瘤细胞？ B细胞1＋B细胞1 B细胞2＋骨髓瘤细胞 B细胞3＋骨髓瘤细胞 B细胞1＋骨髓瘤细胞 B细胞2＋B细胞3 骨髓瘤细胞＋骨髓瘤细胞 B细胞1 B细胞2 骨髓瘤细胞 两两融合的细胞 未融合的细胞 B细胞1 B细胞2 B细胞3 B细胞4 B细胞5 骨髓瘤细胞 注射抗原 多种B淋巴细胞 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 选择培养基 诱导融合 诱导融合 资料分析：HAT培养基 资料一：DNA的合成有D途径和S途径两种途径，其中D途径是在叶酸的辅助下，由氨基酸等小分子合成核苷酸；S途径是利用酶，催化次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶脱氧核苷（T）生成相应的核苷酸。 资料二：已知氨基蝶呤（A）是叶酸的拮抗物；免疫的B淋巴细胞有这两种途径，骨髓瘤细胞缺乏S途径中的酶。 培养基中加入 氨基喋呤 活动二：请根据以上信息，设计从培养液中筛选出杂交瘤细胞的方案。 注射抗原 多种B淋巴细胞 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 杂交瘤细胞 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体 选择培养基 (第一次筛选) 筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞(阳性) 多轮次的克隆化培养和抗体检测 诱导融合 诱导融合 克隆化培养和抗体检测 将杂交瘤细胞群稀释，约每孔1个细胞进行培养 （克隆化培养） 一段时间后，检测各孔 上清液中细胞分泌的抗体 上清液可与特定抗原 结合的培养孔为阳性孔 分泌抗体能跟特定抗原结合的细胞即为所需杂交瘤细胞 多孔板 阳性克隆的筛选 和克隆化培养 多孔细胞培养板 阳性孔 注射抗原 多种B淋巴细胞 用特定抗原对小鼠免疫，并从其脾中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞 培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 多种杂交细胞 用特定的选择培养基进行筛选：只有融合的杂交瘤细胞才能生长 杂交瘤细胞 （既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体） 选择培养基 (第一次筛选)