内容正文:
基因工程的原理和技术
基础达标
1.(2023浙江嘉兴一模)酶具有高效性和专一性,在生物工程中被广泛使用。下列技术中没有酶的应用的是( )
A.制备植物细胞原生质体
B.PCR扩增DNA
C.早期囊胚的胚胎分割
D.贴壁生长的动物细胞的解离
2.下列有关如图所示的黏性末端的说法,错误的是( )
A.甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的
B.甲、乙具有相同的黏性末端,可形成重组DNA分子,但甲、丙不能
C.DNA连接酶的作用位点是b处
D.切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段
3.(2023浙江湖州调研)用农杆菌转化法培育转基因植物,下列叙述错误的是( )
A.目的基因插入Ti质粒的位点是某种限制性内切核酸酶的识别位点
B.若目的基因的序列未知,可以通过构建基因组文库的方法从中获取
C.采用抗原-抗体杂交技术可检测目的基因在受体细胞中是否表达
D.植物受体细胞必须是受精卵细胞,因其全能性最高
4.(2023浙江宁波模拟)科学家培育了一种可以生产人血红蛋白的转基因烟草。下列叙述正确的是( )
A.要获得该转基因烟草,首先要从人的成熟红细胞内获取目的基因
B.人血红蛋白基因导入烟草细胞可采用农杆菌转化法
C.PCR不能用于鉴定受体细胞中是否转入了目的基因
D.该基因转到烟草染色体上使烟草发生染色体畸变
5.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是( )
A.向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNA
B.鉴定DNA时,可以使用龙胆紫染液对DNA进行染色
C.向DNA滤液中加入冷酒精缓慢搅拌,可见玻璃棒上有白色絮状物
D.实验结束后应保存好剩余的二苯胺试剂,以备下次实验时使用
6.(2023浙江金华一模)研究发现OsCBL8基因在提高水稻耐受非生物逆境胁迫方面具有重要作用,为研究OsCBL8基因的作用机理,我们需要通过PCR实验对该基因进行扩增,用于后续研究。关于PCR反应,下列叙述正确的是( )
A.通过PCR获取目的基因的过程中,第三轮循环至少需要消耗4对引物
B.PCR过程中Taq DNA聚合酶催化相邻的游离dNTP之间形成磷酸二酯键
C.PCR产物的大小可以直接通过亚甲基蓝染色进行鉴定
D.PCR过程中要加入缓冲液,一般添加Cu2+来激活DNA聚合酶
7.(2023浙江杭州二模)PCR技术是在DNA聚合酶作用下,在体外进行DNA大量扩增的一种分子生物技术。下列叙述正确的是( )
A.双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B.温度降低后,单链DNA和引物结合的部分碱基序列相同
C.以2条DNA单链为模板,以4种NTP为原料,经耐高温酶在高温下合成2个新的DNA
D.设置PCR仪的温度进行反应可重复循环多次,DNA呈指数式扩增
素能培优
8.(2023浙江杭州第二次联考)研究人员用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子,图1为EcoRⅠ切割该DNA分子后的结果;图2是酶切后的凝胶电泳图谱,其中1号泳道是DNA Marker,2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是( )
图1
图2
A.据图1可知EcoRⅠ的识别序列为-GAATTC-,切割位点在G和A之间
B.据图2可知琼脂糖凝胶的加样孔在B端,且连着电泳槽的负极
C.据图2可知该DNA分子最可能是含1 000个碱基对的环状DNA
D.据图2可知该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个
9.(2023浙江北斗新盟联考)Bt基因为苏云金芽孢杆菌基因,因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的杀虫基因。以下为培育转Bt基因抗虫棉幼苗的基本操作过程,请分析回答下列问题。
(1)目的基因的获取。从基因组文库中获取目的基因,建立基因组文库需用到 酶;也可以从cDNA文库中获取,从其中获取的Bt基因因为缺少 而不利于其在受体细胞中表达;还可以提取 作为模板,通过PCR技术获得。
(2)构建基因表达载体。基因表达载体应具有 ,有利于整合Bt基因。为了方便筛选含有Bt基因的细胞以及使Bt基因能独立复制并稳定存在细胞中,作为表达载体应含有 及 。
(3)将目的基因导入受体细胞。通常用农杆菌转化法将外源基因导入到植物细胞,将 的农杆菌与棉花的愈伤组织细胞混合进行转化,影响转化效率的因素有 (A.重组Ti质粒大小 B.愈伤组织的生理状态 C.培养基的物理性质 D.农杆菌的活性)。然后用 处理以去除农杆菌及筛选含有目的基因的愈伤组织细胞。也可将愈伤组织细胞放在较高渗透压甘露醇溶液内,通过机械法或酶