内容正文:
第1章 发酵工程
第2节 微生物的培养技术及应用
一 微生物的基本培养技术
一、培养基的配制
1.培养基的概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质。
2.作用:培养基用以 微生物或积累其 。
3.培养基种类:不含 (如琼脂)、呈液体状态的培养基为 ,呈固体状态的培养基为 。在液体培养基中加入琼脂后制成的 ,是实验室中最常用的培养基之一。
4.培养基的营养构成:各种培养基的具体配方不同,但一般都含有_____________________
_______________________。此外还需满足微生物生长对 的要求。
二、无菌技术
1.实现无菌技术的途径:获得纯净的微生物培养物的关键是 ,因此,无菌技术应围绕着 展开,主要包括 工作,具体包括两个方面:对操作的空间、操作者的衣着和手进行 ;将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 。做好上述工作后,要注意避免 ,其目的是 ,因此,接下来的许多操作都应在超净工作台并在 附近进行。
2.常用的消毒和灭菌方法:
(1)消毒方法:常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等。日常生活中经常用到 消毒法;对于一些不耐高温的液体,如牛奶,则可使用 消毒法。此外,人们也常使用 进行消毒,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等,除了以上方法,还常用 进行消毒,运用此方法时,适量喷洒 等消毒液,可以加强消毒效果。
(2)灭菌方法:常用的灭菌方法有 等。其中, 是一种利用沸水、流通蒸汽或 进行灭菌的方法,其中 灭菌的效果最好;对于耐高温的和需要保持干燥的物品,可以采用 灭菌;对于微生物的接种工具或其他金属用具应采用 灭菌,此外,在接种过 程中,试管口、瓶口等容易被污染的部位,也可以通过 来灭菌。
三、微生物的纯培养
1.概念:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的 的群体称为培养物。由 繁殖所获得的 称为纯培养物, 就是纯培养。
2.步骤:微生物的纯培养包括 等步骤。
四、酵母菌的纯培养(以酵母菌的纯培养为例)
1.原理:采用 能将单个微生物分散在 培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是 。
2.步骤
(1)制备培养基:制备马铃薯琼脂培养基的正确顺序为: (用文字、“→”表示)。
(2)接种和分离酵母菌:通过 在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步 到培养基表面。经过数次划线后 ,可以分离得到 。
(3)培养酵母菌:完成平板划线后,待 ,将接种后的平板和 倒置,放入 ℃左右的恒温培养箱中培养24~48 h。
3.下图①~⑥为平板划线法接种图示,①操作是将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环的金属丝烧红。②操作是在 冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞。③操作是 。④操作是在火焰附近用接种环蘸取 。⑤操作是 ,并塞上棉塞。⑥操作是:在火焰附近将皿盖打开一条缝隙,用接种环 ,盖上皿盖。然后再 接种环,待其冷却后,从 开始往 内划线。重复以上操作,在三、四、五区域内划线即可得到图⑦培养皿。在重复划线时,注意 。(P13“教材图”)
1. 防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。()(P9“教材”)
2. 微生物在