1.2.1 微生物的基本培养技术（教学讲义）-2023-2024学年高二生物下学期同步教学讲义（2019人教版选择性必修3）

第1章 发酵工程 第2节 一、微生物的基本培养技术 学习目标 必备知识 一、培养基 二、无菌技术 三、微生物的纯培养 拓展延伸 高考链接 模拟演练 1. 概述培养基的成分和配制方法 2. 区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法 3.概述微生物纯培养的基本操作要求 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基，用以培养、分离、 、保存微生物或 。 2．种类： 培养基种类 划分标准 培养基特点 作用 固体培养基 物理性质 加 ，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、 液体培养基 不加凝固剂 常用于 3．营养构成： (1)主要营养物质：水、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐。 (2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 和维生素等 蛋白胨 10 g 等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1 000 mL 水 (3)培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加 ；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至 ；在培养细菌时，一般需要将培养基调至 ；在培养厌氧微生物时，需要提供 的条件。 2、 无菌技术 获得纯净的微生物培养物的关键是 。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括 和_ 。 1．消毒 (1)概念：指使用较为 的物理、化学或 等方法杀死物体表面或内部 微生物。 (2)适用对象：操作的 、操作者的 和手等。 (3)常用方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法和紫外线消毒法 ①煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min，可以杀死微生物的 和一部分 。 ②巴氏消毒法：62～65℃下消毒30 min或80～90℃处理30s～1min，适合一些 的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的 。 ③化学药剂消毒法：用 擦拭双手、用 消毒水源等。 ④紫外线消毒法：接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用 照射30min。在照射前，适量喷洒 或 溶液等消毒液，可以加强消毒效果。 2．灭菌 (1)概念：指使用 的理化方法杀死物体内外 的微生物，包括 和孢子。 (2)适用对象：用于微生物培养的器皿、 用具和 等。 (3)常用方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。 ①湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽或 进行灭菌的方法。 灭菌效果最好，100 kPa、121℃下维持15～30min，常用于 、 等的灭菌。 ②干热灭菌：将灭菌物品放入密闭容器如干热灭菌箱，在160～170℃的热空气中维持2～3h。常用于 和需要 的物品（如玻璃器皿、金属用具等）。 ③灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如涂布器、 、 或其它金属用具，直接在酒精灯火焰的 （外焰）灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口、瓶口等容易被污染的部位，也可以通过 来灭菌。 三、微生物的纯培养 1．概念 (1)培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类 称为培养物。 (2)纯培养物：由 繁殖所获得的微生物群体。 (3)纯培养：获得 的过程。 2．步骤：微生物的纯培养包括 、 、 、 和 等步骤。 3．酵母菌的纯培养 (1)原理：微生物群体分散或稀释成 ，单个细胞繁殖成单个菌落。 菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的 ，这就是菌落。 (2)获得单菌落的方法：采用 法和 法将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形