备课素材：微生物的基本培养技术基础复习 2022—2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

微生物的基本培养技术基础复习 基础填空 一、培养基的配制 1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．作用：培养基用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3．培养基种类：不含凝固剂（如琼脂）、呈液体状态的培养基为液体培养基，呈固体状态的培养基为固体培养基。在液体培养基中加入琼脂后制成的琼脂固体培养基，是实验室中最常用的培养基之一。 4．培养基的营养构成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。此外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 二、无菌技术 1.实现无菌技术的途径：获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，因此，无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌工作，具体包括两个方面：对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。做好上述工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触，其目的是为了避免周围环境中微生物的污染，因此，接下来的许多操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。 2.常用的消毒和灭菌方法： （1）消毒方法：常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等。日常生活中经常用到煮沸消毒法；对于一些不耐高温的液体，如牛奶，则可使用巴氏消毒法。此外,人们也常使用化学药物进行消毒，如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等，除了以上方法，还常用紫外线进行消毒，运用此方法时，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。 （2）灭菌方法：常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。其中，湿热灭菌是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法，其中高压蒸汽灭菌的效果最好；对于耐高温的和需要保持干燥的物品，可以采用干热灭菌；对于微生物的接种工具或其他金属用具应采用灼烧灭菌，此外，在接种过 程中，试管口、瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。 三、微生物的纯培养 1．概念：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 2．步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。 四、酵母菌的纯培养（以酵母菌的纯培养为例） 1.原理：采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 2.步骤 (1)制备培养基：制备马铃薯琼脂培养基的正确顺序为：配制培养基→灭菌→倒平板（用文字、“→”表示）。 (2)接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。 (3)培养酵母菌：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24～48 h。  长句记背 1.向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌， 再经过发酵就可以制成酸奶。由于制作工艺并不复杂，一 些人会在家里自制酸奶，但是食用自制酸奶有时会导致肠胃不适，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。因此，我们在自制酸奶时应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。（P9“从社会中来”改编） 2.研究和应用微生物的前提是防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物，这也是发酵工程的重要基础。在实验室培养微生物，一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；另一方面要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。（P9“教材”） 3.微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称，包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。发酵工程中的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。（P9“相关信息”） 4.微生物培养基需要氮源，这是因为：氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。下表是某微生物培养基的成分，该培养基可用来培养自养（自养、异养）型微生物。若除去①，此培养基不能（能、不能）培养圆褐固氮菌，原因是：圆褐固氮菌虽可以固氮，但其同化作用类型为异养型，培养基中必须提供含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。（P10“旁栏思考”改编） 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL 5.消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（P10“教材”） 6.无菌技术可用来